【摘 要】
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目的 观察微小RNA(miR)-10b沉默对人胰腺癌细胞AsPC-1细胞(以下简称AsPC-1)表达过氧化物酶增殖体激活受体-α蛋白(PPAR-α)的影响.方法 以脂质体转染法将重组反义真核表达载体pPG-CMV-EGFP-miR-10b转染AsPC-1细胞株,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和荧光显微镜检测载体瞬时表达的效率,细胞增殖实验评价不同组间细胞增殖能力的差异;West
【机 构】
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350005福州,福建医科大学附属第一医院肝胆胰外科,350005福州,福建医科大学附属第一医院急诊外科,350005福州,福建医科大学附属第一医院急诊外科,350005福州,福建医科大学附属第一医院
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目的 观察微小RNA(miR)-10b沉默对人胰腺癌细胞AsPC-1细胞(以下简称AsPC-1)表达过氧化物酶增殖体激活受体-α蛋白(PPAR-α)的影响.方法 以脂质体转染法将重组反义真核表达载体pPG-CMV-EGFP-miR-10b转染AsPC-1细胞株,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和荧光显微镜检测载体瞬时表达的效率,细胞增殖实验评价不同组间细胞增殖能力的差异;Western blot 检测细胞PPAR-α蛋白的表达.结果 转染反义组miR-10b减少至对照组的14％.细胞增殖减少至对照组的36％,差异有统计学意义(P＜0.05).细胞PPAR-α蛋白的表达水平:反义组1 230.5±110.4,对照组2 398.1±156.3和2 603.7±227.5,反义组与对照组差异均有统计学意义(P＜0.05);细胞凋亡实验:反义组凋亡率为19.4％,对照组凋亡率为10.1％和11.5％.结果提示反义组细胞的凋亡率增高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 miR-10b沉默可抑制胰腺癌细胞PPAR-α蛋白的表达,并抑制胰腺癌细胞增殖,促进细胞凋亡。
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