【摘 要】
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目的:构建和表达可调控性鼠TGF-β1重组腺病毒载体.方法:采用常规分子生物学方法,从刀豆A刺激的小鼠脾细胞抽提总RNA,克隆鼠TGF-β1基因;经穿梭载体与可调控性腺病毒载体骨架
【机 构】
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第二军医大学附属长海医院实验诊断科
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目的:构建和表达可调控性鼠TGF-β1重组腺病毒载体.方法:采用常规分子生物学方法,从刀豆A刺激的小鼠脾细胞抽提总RNA,克隆鼠TGF-β1基因;经穿梭载体与可调控性腺病毒载体骨架连接,鉴定后在HEK293细胞包装.获得高滴度病毒后,取上清采用ELISA方法鉴定目的基因的表达.结果:TGF-β1重组腺病毒经测序、限制性内切酶酶切分析、PCR等鉴定,与预期结果一致;病毒感染细胞的上清液经ELISA检测,TGF-β1的表达量为(91.16±3.70) ng/L.结论:构建的可调控性鼠TGF-β1重组
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