pCDNA3-PTH真核表达载体构建及其在细胞内表达

来源 :畜牧与兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ktyl2000
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以鸡甲状旁腺组织中总RNA为模板,采用RT—PCR法获得甲状旁腺素(PTH)cDNA。将该基因克隆至pCDNA3载体中,构建真核细胞表达载体pCDNA3-PrH,DNA测序证明获得了町H基因,其序列与GenBank报道序列比较,核苷酸同源性为99.4%,在第159位处存在C→A的有意义突变。将测序正确的PTH基因在多聚乙肽亚胺(PEI)介导下转染COS-1细胞,通过间接免疫荧光试验(IFA)检测到了PTH在COS-1中的表达。PTH基因克隆和表达均获得成功,为进一步探讨该基因在改善蛋壳质量中的应用奠定了基
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