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doi：10.3969/j.issn.1007-614x.2013.19.68
现有的研究表明，表皮生长因子受体（EGFR）相关信号通路在肺癌的发生和发展中起重要作用。EGFR酪氨酸激酶抑制剂（EGFR-TKIS）是目前针对EGFR治疗非小细胞肺癌（NSCLC）的重要分子靶向药物。EGFR的不同存在状态与TKIS的疗效相关。EGFR在非小细胞肺癌中高表达，免疫组化法是一种有效的检测NSCLC标本中蛋白质水平的方法[1]，但多数集中在NSCLC手术切除标本的研究上[2]，对于纤维支气管镜（简称纤支镜）活检小标本的研究较少。在此我们应用免疫组化技术对纤支镜NSCLC活检标本的EGFR基因进行检测，探讨EGFR在非小细胞肺癌患者中的表达、检测及临床意义。
资料与方法
一般资料：2009年10月～2012年10月160例经病理诊断为NSCLC的活检标本，其中男101例，女59例，年龄31～83岁，中位数62岁；有吸烟史112例；组织学类型：腺癌104例，鳞癌44例，腺鳞癌5例，大细胞癌7例。所检患者均为初次诊断。另外收集10例正常肺组织活检标本和10例癌前病变肺组织活检标本进行对照。
试剂方法：石蜡包埋组织HE染色。免疫组织化学采用EnVisim二步法，抗体EGFR。CK5/6（标记鳞癌），CK8（标记腺癌），所有一抗均为单克隆抗体，均为工作液。参照试剂盒说明操作，关键步骤如下：切片常规脱蜡至水，高压修复抗原，3%H2O2孵育10分钟，滴加一抗4℃过液，滴加二抗37℃孵育20分钟。DAB染色，苏木精对比染色，透明封固，以PBC代替做空白对照。结果判定：EGFR表达主要定位于胞浆/胞核是棕黄色或棕褐色颗粒状。
采用参考文献的方法进行打分[1]，0分无色，1分浅着色，2分深着色，3分棕褐色；按400视野下阴性细胞所占百分比打分：0阴性，1分阳性细胞≤25%，2分26%～50%，3分51%～75%，4分≥75%。染色结果分1级标准为着色强度乘以阳性细胞比例，0分阴性（-），1～3分弱阳性（+），4～6分中度阳性（++），8～12分强阳性（+++）。
统计学处理：应用SPSS16.0统计软件进行分析。采用χ2检验分析免疫组织化学结果；以P<0.05为具有显著统计学差异，P>0.05差异无统计学意义。
结 果
160例NSCLC患者中，EGFR阳性66例（41.2%）。其中男45例（44.6%），女21例（35.6%）；腺癌55例（52.8%），鳞癌6例（13.6%）。腺鳞癌2例（40%），大细胞肺癌3例（42.8%）。经统计学分析，腺癌鳞癌两者差异有统计学意义（P<0.05），大细胞癌、腺鳞癌与腺癌相比无统计学意义（P>0.05）。
160例中有120例获得手术切除标本，将纤支镜活检标本和手术切除标本EGFR基因检测结果对比，活检标本阳性率低于手术标本，但差异无统计学意义（P>0.05）。
10例正常肺组织中只有1例EGFR表达弱阳性。10例癌前病变肺组织中2例EGFR弱阳性表达。由此可见肺癌组织中EGFR的表达明显高于正常肺组织，而且EGFR在正常肺组织、癌前病变和肺癌组织中的表达是逐级升高的[3]。
讨 论
结果显示，EGFR基因检测肺NSCLC，腺癌阳性率高于鳞癌，与大细胞肺癌差异无统计学意义；腺癌中男性与女性患者EGFR基因阳性率差异无统计学意义；EGFR阳性率与患者性别年龄无关，同相关资料一致[4，5]。160例中有135例获得手术切除标本，将其EGFR基因检测结果与纤支镜活检结果相比较，阳性率稍高但差异无统计学意义。由此可见EGFR基因检测可行性好，对临床进一步行手术切除、放化疗或者靶向治疗提供很好的参考价值。
近年来肺癌的发病率和死亡率迅速上升，跃居肿瘤第1位。虽然治疗技术有了很大提高，但5年生存率没有明显改善[6]。因此预防并控制远处转移是肺癌治疗中亟待解决的问题。我们应用纤支镜技术检测EGFR基因不仅可行，而且实现了早发现、早诊断、早治疗；方法安全、直观是中小医院可普及的一项检测方法；并且具有创伤小、痛苦少、费用低等人性化优势，具有重要现实意义。
参考文献
1 李榕，韩宝惠，等.EGFR检测在肺癌中的临床意义[J].临床肿瘤学杂志，2004，9（4）：420-425.
2 梁智勇，曾暄，张静，等.非小细胞肺癌290例表皮生长因子受体基因突变和拷贝数的检测分析[J].中华病理学杂志，2008，37（10）：654-659.
3 Eberhand DA，Giaccone G，Johnson BE，et al.Biomarkers of response to epidermal growth factor receptor inhibitors in Non-Small-Cell Lung Cancer Working Group：standardardization for use in the clinical trial setting.J Clin Oncol，2008，26（6）：983-994.
4 林云恩，何莎，等.纤维支气管镜非小细胞肺癌活检标本的表皮生长因子受体基因检测[J].中华病理学杂志，2011，40（2）：529-5807.
5 曾暄，武莎斐，等.非小细胞肺癌EGFR和HERI基因状态及相关性[J].中华病理学杂志，2006，35（7）：398-402.
6 Parkin DM，Bray FI，Devesa SS.Cancer burden in the year 2000.The global picture[J].Eur J Canceren，2001，37（8）：4-66.
现有的研究表明，表皮生长因子受体（EGFR）相关信号通路在肺癌的发生和发展中起重要作用。EGFR酪氨酸激酶抑制剂（EGFR-TKIS）是目前针对EGFR治疗非小细胞肺癌（NSCLC）的重要分子靶向药物。EGFR的不同存在状态与TKIS的疗效相关。EGFR在非小细胞肺癌中高表达，免疫组化法是一种有效的检测NSCLC标本中蛋白质水平的方法[1]，但多数集中在NSCLC手术切除标本的研究上[2]，对于纤维支气管镜（简称纤支镜）活检小标本的研究较少。在此我们应用免疫组化技术对纤支镜NSCLC活检标本的EGFR基因进行检测，探讨EGFR在非小细胞肺癌患者中的表达、检测及临床意义。
资料与方法
一般资料：2009年10月～2012年10月160例经病理诊断为NSCLC的活检标本，其中男101例，女59例，年龄31～83岁，中位数62岁；有吸烟史112例；组织学类型：腺癌104例，鳞癌44例，腺鳞癌5例，大细胞癌7例。所检患者均为初次诊断。另外收集10例正常肺组织活检标本和10例癌前病变肺组织活检标本进行对照。
试剂方法：石蜡包埋组织HE染色。免疫组织化学采用EnVisim二步法，抗体EGFR。CK5/6（标记鳞癌），CK8（标记腺癌），所有一抗均为单克隆抗体，均为工作液。参照试剂盒说明操作，关键步骤如下：切片常规脱蜡至水，高压修复抗原，3%H2O2孵育10分钟，滴加一抗4℃过液，滴加二抗37℃孵育20分钟。DAB染色，苏木精对比染色，透明封固，以PBC代替做空白对照。结果判定：EGFR表达主要定位于胞浆/胞核是棕黄色或棕褐色颗粒状。
采用参考文献的方法进行打分[1]，0分无色，1分浅着色，2分深着色，3分棕褐色；按400视野下阴性细胞所占百分比打分：0阴性，1分阳性细胞≤25%，2分26%～50%，3分51%～75%，4分≥75%。染色结果分1级标准为着色强度乘以阳性细胞比例，0分阴性（-），1～3分弱阳性（+），4～6分中度阳性（++），8～12分强阳性（+++）。
统计学处理：应用SPSS16.0统计软件进行分析。采用χ2检验分析免疫组织化学结果；以P<0.05为具有显著统计学差异，P>0.05差异无统计学意义。
结 果
160例NSCLC患者中，EGFR阳性66例（41.2%）。其中男45例（44.6%），女21例（35.6%）；腺癌55例（52.8%），鳞癌6例（13.6%）。腺鳞癌2例（40%），大细胞肺癌3例（42.8%）。经统计学分析，腺癌鳞癌两者差异有统计学意义（P<0.05），大细胞癌、腺鳞癌与腺癌相比无统计学意义（P>0.05）。
160例中有120例获得手术切除标本，将纤支镜活检标本和手术切除标本EGFR基因检测结果对比，活检标本阳性率低于手术标本，但差异无统计学意义（P>0.05）。
10例正常肺组织中只有1例EGFR表达弱阳性。10例癌前病变肺组织中2例EGFR弱阳性表达。由此可见肺癌组织中EGFR的表达明显高于正常肺组织，而且EGFR在正常肺组织、癌前病变和肺癌组织中的表达是逐级升高的[3]。
讨 论
结果显示，EGFR基因检测肺NSCLC，腺癌阳性率高于鳞癌，与大细胞肺癌差异无统计学意义；腺癌中男性与女性患者EGFR基因阳性率差异无统计学意义；EGFR阳性率与患者性别年龄无关，同相关资料一致[4，5]。160例中有135例获得手术切除标本，将其EGFR基因检测结果与纤支镜活检结果相比较，阳性率稍高但差异无统计学意义。由此可见EGFR基因检测可行性好，对临床进一步行手术切除、放化疗或者靶向治疗提供很好的参考价值。
近年来肺癌的发病率和死亡率迅速上升，跃居肿瘤第1位。虽然治疗技术有了很大提高，但5年生存率没有明显改善[6]。因此预防并控制远处转移是肺癌治疗中亟待解决的问题。我们应用纤支镜技术检测EGFR基因不仅可行，而且实现了早发现、早诊断、早治疗；方法安全、直观是中小医院可普及的一项检测方法；并且具有创伤小、痛苦少、费用低等人性化优势，具有重要现实意义。
参考文献
1 李榕，韩宝惠，等.EGFR检测在肺癌中的临床意义[J].临床肿瘤学杂志，2004，9（4）：420-425.
2 梁智勇，曾暄，张静，等.非小细胞肺癌290例表皮生长因子受体基因突变和拷贝数的检测分析[J].中华病理学杂志，2008，37（10）：654-659.
3 Eberhand DA，Giaccone G，Johnson BE，et al.Biomarkers of response to epidermal growth factor receptor inhibitors in Non-Small-Cell Lung Cancer Working Group：standardardization for use in the clinical trial setting.J Clin Oncol，2008，26（6）：983-994.
4 林云恩，何莎，等.纤维支气管镜非小细胞肺癌活检标本的表皮生长因子受体基因检测[J].中华病理学杂志，2011，40（2）：529-5807.
5 曾暄，武莎斐，等.非小细胞肺癌EGFR和HERI基因状态及相关性[J].中华病理学杂志，2006，35（7）：398-402.
6 Parkin DM，Bray FI，Devesa SS.Cancer burden in the year 2000.The global picture[J].Eur J Canceren，2001，37（8）：4-66.