【摘 要】
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针对克雷伯氏肺炎杆菌(Klebsiella pneumoniae)TU AC01的电击转化方法进行了研究.主要考察了培养基EDTA的浓度、细胞的生长状态、感受态细胞的密度、电击电压、质粒浓度等参
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针对克雷伯氏肺炎杆菌(Klebsiella pneumoniae)TU AC01的电击转化方法进行了研究.主要考察了培养基EDTA的浓度、细胞的生长状态、感受态细胞的密度、电击电压、质粒浓度等参数对转化效率的影响,建立了一种适合K.pneumoniae TUAC01的电击转化方法.结果:K.pneumoniae TUAC01培养基中添加EDTA至终浓度0.7mmol/L;当细胞生长至OD600为0.7时收集菌体,制作感受态细胞;制作的感受态细胞浓度OD600大于30时,使用2mm的电转杯在2kV的电压下转化,转化效率达到最大值,达到8.58× 105cfu/μgDNA.
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