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目的
探讨高强度聚焦超声(HIFU)辐照对人胰腺癌移植瘤凋亡相关基因的影响。
方法建立裸小鼠人胰腺癌YY-1细胞移植瘤模型并进行HIFU辐照,同时设置对照组,用原位末端转移酶标记(TUNEL)法检测肿瘤细胞凋亡率,Agilent人类基因表达谱芯片分析凋亡相关的差异性基因变化,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白印迹法(Western blot)对筛选出的部分基因进行验证。
结果治疗后第7、14天,辐照组肿瘤细胞凋亡率均高于对照组,凋亡率分别为[(63.6%±15.2%)比(19.0%±2.4%),P<0.01]、[(41.4%±7.3%)比(18.0%±2.4%),P<0.01]。表达谱芯片分析示与凋亡信号传导通路相关的差异表达基因共69个,其中上调基因44个,下调基因25个。选取其中4条基因进行RT-PCR验证,其表达结果与芯片结果一致;Western印迹结果示治疗后第7、14天,辐照组Bax蛋白相对表达量高于对照组,分别为[(0.39±0.11)比(0.20±0.09),P<0.05]和[(0.46±0.12)比(0.24±0.10),P<0.05]; Bcl-2蛋白相对表达量低于对照组,分别为[(0.68±0.14)比(1.56±0.21),P<0.05]和[(0.51±0.16)比(1.57±0.22),P<0.05]。
结论HIFU辐照可引起多基因表达改变,通过调控多个信号通道促进肿瘤细胞凋亡,外源性凋亡通道可能发挥主要作用,结合进一步研究有助于阐释HIFU调控凋亡的机制。