【摘 要】
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通过差速离心和蔗糖密度梯度离心法对猪繁殖与呼吸综合征病毒沪1(PRRSV-S1)株进行抗原纯化.免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0融合,用间接FLISA和有限稀释法,获得2株稳定分泌抗
【基金项目】
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上海市高等学校优秀青年教师基金;
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通过差速离心和蔗糖密度梯度离心法对猪繁殖与呼吸综合征病毒沪1(PRRSV-S1)株进行抗原纯化.免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0融合,用间接FLISA和有限稀释法,获得2株稳定分泌抗PRRSV单抗的杂交瘤细胞株,分别命名为AG1、BD3.ELISA交叉试验和阻断试验表明,2株单抗具有高度特异性.AG1可与PRRSV-S1,欧洲株LV,美洲株VR-2332反应,而BD3与美洲株VR-2332反应较弱,2株单抗对猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)均不反应.阳性杂交瘤细胞的上清液效价是1:256～1:512,腹水效价分别在1:103～1:105之间.AG1和BD3各有100条染色体,琼脂双扩散试验结果表明AG1属于IgG2b,BD2属于IgM.Western blot试验表明AG1和BD3是针对N蛋白抗原表位的特异性单抗.
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