【摘 要】
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本文主要报道了用3种不同方法从S8黑曲霉菌丝体中提取基因组DNA,最适方法是经改进的Vitagene试剂盒法.PCR扩增效果最好的是设计时没有去掉phyA基因内含子的引物,获得的特异性
【机 构】
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重庆市养猪科学研究院,四川农业大学动物科技学院,重庆市养猪科学研究院
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本文主要报道了用3种不同方法从S8黑曲霉菌丝体中提取基因组DNA,最适方法是经改进的Vitagene试剂盒法.PCR扩增效果最好的是设计时没有去掉phyA基因内含子的引物,获得的特异性PCR产物长约1.5kb.同时对PCR反应体系进行了优化.对扩增出的目的片段用3种不同方法进行纯化回收,结果是PCR Fragment Recovery Kit法回收效果最好,其产量可达到约10 ng/μL.根据已报道的植酸酶phyA基因序列酶切位点,对回收的目的片段进行酶切鉴定,该基因能被BamHⅠ、SalⅠ酶切,不能被H
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