高糖状态和VE-cadherin对滋养细胞表皮生长因子受体表达的影响

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目的 探讨高糖状态和钙依赖黏附蛋白(VE-cadherin)对滋养细胞表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)表达的影响.方法 体外培养人绒毛外滋养细胞(HTR8/SVneo),分别正常条件下培养设为正常(normal,N)组(5.5mmol/L葡萄糖),给予25mmol/L葡萄糖刺激设为高糖(high glucose,HG)组,给予5.5μg/mLVE-cadherin细胞因子VE设为VE组,给予高糖刺激和VE-cadherin细胞因子刺激设为高糖VE组,给予PI3K通路阻断剂LY294002设为P组;使用实时定量PCR(quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)方法分别检测各组EGFR、胰岛素样生长因子-1受体(insulin-like growth factor-1 receptor,IGF-1R)的表达,使用蛋白质免疫印迹法(western blot,WB)分别检测各组EGFR、IGF-1R、葡萄糖转运蛋白3(Glucose transporter protein 3,GLUT3)等相关蛋白表达水平及磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/AKT)表达与磷酸化水平,并分析它们之间的调控关系.结果 HG组、VE组、PI3K阻断剂组和高糖VE组的EGFR、IGF-1R的mRNA表达水平明显低于N组(P<0.05).HG组、VE组、PI3K阻断剂组与高糖VE组的PI3K、AKT的磷酸化水平明显低于N组(P<0.05);HG组GLUT3膜蛋白表达水平明显低于其它组(P<0.05).结论 在滋养体细胞模型中,高糖环境和VE细胞因子刺激下EGFR、IGF-1R表达水平下降,抑制了PI3K/AKT相关通路蛋白的表达和磷酸化,GLUT3表达下调,摄取葡萄糖能力下降,可能是GDM的发病机制之一.
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