【摘 要】
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目的制备并纯化心肌Na_(V)1.5通道IQ蛋白,探讨钙调蛋白(CaM)突变体CaM_(D130G)与IQ基序的结合作用,为后续体外实验明确长QT综合征的发病机制奠定基础。方法采用同源建模和蛋
【机 构】
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中国医科大学药学院药物毒理学教研室
【基金项目】
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国家自然科学基金(31400981),医学电生理学教育部重点实验室开放基金(201505)
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目的制备并纯化心肌Na_(V)1.5通道IQ蛋白,探讨钙调蛋白(CaM)突变体CaM_(D130G)与IQ基序的结合作用,为后续体外实验明确长QT综合征的发病机制奠定基础。方法采用同源建模和蛋白对接的方法预测突变体CaM_(D130G)与IQ蛋白的结合,利用基因重组技术将重组质粒pGEX-6P-1/GST-IQ转化至原核表达载体大肠杆菌中,并诱导表达该蛋白,通过超声破碎方法提取蛋白并使用GS-4B孵育纯化IQ蛋白,SDS-PAGE确认蛋白的制备效果,Pull-down assay方法检测CaM_(D130
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