细粒棘球蚴抗原B酵母表达载体的克隆与序列分析

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目的获得重组细粒棘球蚴抗原B(EgB)的真核表达蛋白,构建EgB酵母表达重组体,并对构建的重组体进行序列分析.方法以原核重组体JM109-pMal2xEgB作为模板,采用聚合酶链式反应(PCR)扩增EgB片断.目的基因EgB片断插入酵母表达载体pYES2/NT B,再将酵母表达重组体转化DH5a菌,并对转化筛选的重组体进行序列分析.结果共筛选得到16个重组克隆,其中7个克隆证实为EgB正确序列,并与酵母表达载体的开放阅读框(ORF)相一致.结论成功地将细粒棘球蚴抗原B基因构建入酵母表达载体pYES2/NT B的开放阅读框.此重组体可在酵母中进一步表达特异性蛋白.
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