【摘 要】
：
目的 建立一种新的基于焦磷酸测序技术的HBV前C区/基本核心启动子(pre-C/BCP)突变的检测方法,并验证该方法的准确性、重复性、可靠性及进行初步临床检测.方法 通过对基因库中
【机 构】
：
中山大学附属第五医院消化内科,Digestion Department,武汉大学附属中南医院消化内科
论文部分内容阅读
目的 建立一种新的基于焦磷酸测序技术的HBV前C区/基本核心启动子(pre-C/BCP)突变的检测方法,并验证该方法的准确性、重复性、可靠性及进行初步临床检测.方法 通过对基因库中100个HBV基因序列的比对分析,设计出专用的pre-C/BCP焦磷酸测序的PCR扩增引物及测序引物,并以标准质粒作为标准品建立其相应的检测方法.通过对标准质粒及PCR扩增产物、经Sanger测序的HBV血清及基因芯片检测结果分析,以验证本检测方法检测的标本的特异度及本方法的检测可靠性.最后对60例HBV临床血清标本进行了初步的检测.结果 本研究成功地建立了pre-C/BCP突变热点的焦磷酸测序方法.其检测结果与pre-C/BCP质粒,Sanger测序法的检测结果符合率达100%(Kappa=1.0),基因芯片检测结果的诊断符合率为91.7%.同一批血清标本的重复率达97.8%,阳性PCR产物测序的重复率100%.充分证明了本方法的准确性、重复性、可靠性.初步批量化检测60份临床标本结果表明,本方法能一次批量检出包括pre-C/BCP的单一、多位点的突变,并发现了一例少见的BCP T1758C突变.结论 本实验所建立的pre-C/BCP突变热点的焦磷酸测序方法是一种可一次性检测HBV pre-C/BCP多位点突变的高通量的检测方法.
其他文献
目的 探讨肺癌患者化疗前后的血栓前状态(PTS)及低分子质量肝素治疗的临床意义。方法选取肺癌患者40例，均为ⅢB-Ⅳ期肺癌，其中20例进行常规化疗，20例进行常规化疗联合低分子量肝
目的 探讨青年女性乳腺癌的临床病理特点。方法横断面研究山西省肿瘤医院乳腺中心2000年1月至2008年12月间收治的172例35岁以下青年女性乳腺癌患者的临床病理资料。结果青年
本研究结合急性阑尾炎手术患者资料,总结多中心临床路径构建和应用与护理路径相互作用及影响的效果.一、对象与方法1.对象来源:将2010年1月至6月688例急性阑尾炎手术患者资料
深静脉置管是危重症抢救中可靠、有效的抢救措施之一,包括:锁骨下静脉穿刺,颈内静脉穿刺,股静脉穿刺三种方式.2008年10月至2010年12月,本院对100例患者实施了深静脉穿刺置管,
Abstract A 43-year-old female with a 3-month history of paroxysmal irritating cough presented progressive chest tightness and shortness of breath. Laboratory da
目的观察银杏达莫注射液对脑梗死患者血液流变学、血脂及血清C反应蛋白的影响。方法将62例脑梗死患者按照随机数字表法分为两组各31例，均给予常规治疗。对照组在常规治疗基础
The photosynthetic characteristics and ultrastructure of chloroplast of cucumber in solargreenhouse were studied. The result showed that the photosynthetic rate
隧道修复技术(Tunnel Restoration,TR)用来治疗后牙邻面龋时,可以最大程度的保存健康牙体组织,保留邻牙接触关系.该文就这一技术的临床成功率,导致治疗失败的原凶以及影响治
目的 对关节镜治疗复发性肩关节前脱位的疗效进行评价.方法 2001年1月至2006年3月关节镜治疗复发性肩关节前脱位患者52例,其中44例获得随访,随访时间12～54个月,平均26个月.对
目的:采用人单核细胞株(THP-1),建立小剂量BLP诱导THP-1细胞对BLP耐受的细胞模型,观察BLP诱导THP-1细胞对BLP耐受及对LPS交叉耐受时细胞actin骨架的变化情况,并探讨细胞actin