【摘 要】
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为了建立快速、准确检测生鲜乳中布鲁氏杆菌的方法,试验采用细菌基因组提取试剂盒提取生鲜乳中的布鲁氏杆菌基因组DNA,针对布鲁氏杆菌保守抗原Omp31、Omp25设计引物,并设计细
【机 构】
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内蒙古农牧业科学院; 内蒙古自治区疾病预防控制中心;
【基金项目】
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国家农产品质量安全风险评估重大专项项目(GJFP201600801)
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为了建立快速、准确检测生鲜乳中布鲁氏杆菌的方法,试验采用细菌基因组提取试剂盒提取生鲜乳中的布鲁氏杆菌基因组DNA,针对布鲁氏杆菌保守抗原Omp31、Omp25设计引物,并设计细菌16S r DNA基因序列作为内参引物,通过引物浓度和退火温度的调整优化,建立了生鲜乳中布鲁氏杆菌的多重PCR检测方法。结果表明:建立的多重PCR检测结果与预期结果一致,可以扩增出布鲁氏杆菌Omp31(472 bp)、Omp25(140 bp)特异性片段以及细菌16S r DNA的通用片段。而对于其他致病菌只能扩增出1 500 bp的细菌16S r DNA通用片段,具有较强的特异性。该多重PCR检测方法灵敏度可达1×105cfu/m L,较单一PCR检测方法灵敏度有所下降。说明本试验建立的检测方法可完成生鲜乳中布鲁氏杆菌的快速检测。
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