龙牙楤木总皂苷通过调控AMPK/Nrf2信号抑制缺氧/复氧诱导的心肌细胞铁死亡

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目的:探究龙牙楤木总皂苷对AMPK/Nrf2信号通路的影响。方法:将人心肌细胞AC16进行体外培养,分为空白对照组、缺氧/复氧模型组、铁离子螯合剂对照组,铁离子螯合剂组、龙牙楤木总皂苷低(0.02μg/m L)浓度组、龙牙楤木总皂苷中(0.1μg/m L)浓度组、龙牙楤木总皂苷高(0.5μg/m L)浓度组,丹参滴丸(50μg/m L)阳性对照组,AMPK抑制剂Compound C(5μg/m L)+龙牙楤木总皂苷组,Nrf2抑制剂ML385(2μg/m L)+龙牙楤木总皂苷(0.5μg/m L)组。MTT法检测细胞存活率;试剂盒检测细胞内Fe2+、ROS水平;免疫荧光法检测脂质过氧化物及GPX4、ACSL蛋白表达水平;qRT-PCR检测GPX4、ACSL4 m RNA表达,Western Blot检测GPX4、ACSL4、p-AMPK、Nrf2蛋白表达;结果:与空白对照组比较,模型组细胞存活率、GPX4 m RNA表达显著降低,Fe2+含量、ROS和脂质过氧化水平、ACSL4 m RNA表达显著升高,p-AMPK、Nrf2蛋白表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,铁离子螯合剂组细胞存活率、GPX4 m RNA表达显著升高,Fe2+、ROS、脂质过氧化水平及ACSL4 m RNA表达显著降低(P<0.01);龙牙楤木总皂苷各组和丹参滴丸组细胞存活率及GPX4、p-AMPK、Nrf2蛋白表达显著升高,心肌细胞中Fe2+、ROS、脂质过氧化水平及ACSL4蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。与龙牙楤木总皂苷组比较,Compound C+龙牙楤木总皂苷组和ML385+龙牙楤木总皂苷组细胞存活率显著降低,Fe2+含量显著升高,Nrf2蛋白表达显著降低,Compound C+龙牙楤木总皂苷组ROS和脂质过氧化水平显著升高,p-AMPK蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:龙牙楤木总皂苷可通过激活AMPK/Nrf2信号通路,抑制H/R诱导的心肌细胞铁死亡。
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