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Taq DNA聚合酶由于其具有非模板依赖型末端转移酶活性常使PCR产物的3＇末端形成一个dA突出.实验通过在pGEM-7Zf(+)质粒的多克隆位点中插入少数新的酶识别位点,使其改造成为能被Xcm I限制内切酶消化后可形成3＇末端具有一个dT突出的pGME T-载体,从而易于与具有3＇dA的PCR产物直接连接,并通过蓝白斑筛选而获得重组克隆.这种新构建的载体由于新添了相应的酶切位点还可用BamHI或HindⅢ单酶切出其中所插入的片断,方便了后续分析工作的进行.