鼠伤寒沙门菌Ssek3基因的序列特征分析与表达纯化

来源 :中华微生物学和免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:SHAWSHAW11
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目的

研究鼠伤寒沙门菌Ssek3基因的序列结构特征及蛋白表达纯化。

方法

从鼠伤寒沙门菌SL1344株获得Ssek3基因的序列,利用生物信息学方法进行系统性分析,并进行原核表达及纯化。

结果

软件预测分析结果显示,SseK3蛋白由335个氨基酸,72个氨基酸残基组成,蛋白质理论相对分子质量(Mr)为37.89×103,分子式为C1700 H2629 N463O497S12,等电点为6.7,属于稳定存在的亲水蛋白质。该蛋白质无信号肽也无跨膜区,属于膜内蛋白,含有5个N-糖基化位点、3个O-糖基化位点、33个磷酸化位点、22个B细胞线性结合位点和11个T细胞结合位点以及21个二硫键位点。二级结构中,α-螺旋(Hh)占34.03%(114个),伸展链(Ee)占21.49%(72个),β-折叠(Tt)占8.96%(30个),无规则卷曲(Cc)占35.52%(119个)。实验结果显示,Ssek3基因大小为1 008 bp,SDS-PAGE分析显示,Ssek3基因在原核表达系统中以分泌蛋白形式存在,表达的融合蛋白大小(Mr)约为40×103

结论

本研究成功克隆了鼠伤寒沙门菌Ssek3基因,对其进行序列分析和原核表达,为深入探究Ssek3蛋白在鼠伤寒沙门菌感染宿主细胞中的作用提供资料。

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