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【摘要】目的：利用分子生物学方法研究重庆地区儿童手足口病流行病学特征。方法：收集2013年1月至2013年12月我院门诊及住院HFMD患儿3286例，分为死亡组、重症组和普通组，进行人肠道病毒71型（EV71）、柯萨奇病毒16型（CAl6）和肠道病毒通用型（EV）荧光定量PCR检测。结果：人肠道病毒总阳性率为61.72%，肠道病毒71型（EV71）占29.4%柯萨奇病毒16型（CA16）占53.21%，EV71和CA16混合感染占0.91%，肠道病毒其它型占16.39%；四个季度间人肠道病毒总阳性率有显著统计学差异（P<0.01）；重症与普通组的病原体感染类别有显著差异（P <0.01）。结论：1、2013年綦江手足口病病原体感染以CA16感染为主，发病高峰期在6月。2、重症患者以感染EV71为主，死亡病例均为EV71感染。3、重症及死亡手足口病患儿以3岁以下为主。
【关键词】手足口病；儿童；肠道病毒71型；柯萨奇病毒16型
[Abstract] Objective： To study Epidemiology of children HFMD in Qijiang area using molecular biology methods. Methods： Collected 3286 cases of HFMD from January 2013 to December 2013 in Qijiang traditional Chinese Medicine Hospital and Qijiang People's Hospital， then tested EV71， CA16 and EV by PCR. Results： The total positive rate of human enterovirus was 61.72% with EV71， CA16， EV and other types each accounted for 29.4%， 53.21%， 0.91%， 16.39%. Total positive rate among four quarters had statistically significant differences （P < 0.01）. Pathogen categories infected between severe and common groups had significant difference （P < 0.01） . Conclusion： The main Pathogen of HFMD was CA16 in 2013 and the peak incidence occurred in June. EV71 infection might result in critically ill and all deaths cases were EV71 infection. Children with severe or death cases mainly were under the age of 3.
[Keywords ] HFMD； Children； EV71； CA16
【中图分类号】R4 【文献标识码】A 【文章编号】1671-8801（2015）03-0013-02
手足口病（Hand foot mouth disease ， HFMD） 是婴幼儿常见的传染病，由肠道病毒引起，临床上以发热和手、足、口腔等部位出现皮疹、溃疡等表现为主，个别患者可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等并发症[1，2]。
引起本病的肠道病毒有20 多种（型） 其中柯萨奇病毒（Coxasckievirus） A16 型（CoxA16） 和肠道病毒71 型（ Enterovirus71，EV71） 最常见[3]，2013年全国多个省份暴发儿童手足口病，綦江地区手足口病例数亦呈骤增趋势，我院儿童住院、门诊病例更是暴增，并出现死亡病例，手足口病治疗和预防任务十分艰巨，掌握綦江地区儿童手足口病的流行病学资料刻不容缓。
1.材料与方法
1.1.研究对象
收集2013年1月至2013年12月我院门诊及住院HFMD可疑患儿3286例，其中男1894例，1392例，年龄5个月-14岁3个月。其中死亡病例5例，重症病例115例，普通手足口病例3166例。全部病例诊断标准参考《手足口病预防控制指南（2010年）版》。同时收集、整理、分析病例资料。
1.2.试剂与仪器
实时荧光定量PCR仪为美国ABI 7500型、定性PCR仪为美国Bio-Rad C1000型，EV71型、CAl6型和肠道病毒通用型核酸检测试剂盒由中山大学达安基因股份有限公司提供。
1.3.样本采集
采集患儿病程3天内的粪便标本，粪便标本的采集量约30g/份，采集双份标本于无菌采便杯内，-80℃保存。
1.4. PCR检测
样本处理与一步法荧光定量RT—PCR检测参考说明书进行
1.5.统计学处理
SPSS13.0软件包进行，P<0.05差异有统计学意义。
2.结果
2.1.手足口病肠道病毒总阳性率及各病原体的构成
3286例手足口病例中，肠道病毒通用型（EV）2028例，肠道病毒总阳性率为61.72%。2028例肠道病毒阳性病例中，肠道病毒71型（EV71）598例，占29.49%；柯萨奇病毒16型（CA16）1079例，占53.21%；EV71和CA16混合感染18例，占0.91%；肠道病毒其它型332例，占16.39%。2013年綦江地区手足口病病原体感染以柯萨奇病毒16型（CA16）为主。 2.2.手足口病病例数、肠道病毒总阳性率及各病原体阳性率的季节分布
3286例手足口病例中，1-3月93例，阳性10例；4-6月1739例，阳性1245例；7-9月924例，阳性444例；10-12月530例，阳性329例，四个季度间病原体总阳性率卡方检验X2=1000.446，P=0.000<0.01，有显著统计学差异，綦江地区4-6月为手足口病暴发高峰期，同时阳性检出率最高。
2.3.死亡、重症与普通手足口病的病原体类别感染差异
5例死亡病例均检出EV71阳性，重症94例EV71阳性，重症组和普通组四种类别的感染有显著统计学差异，X2=629.887，P=0.000<0.01；EV71和CA16感染在重症组和普通组中的构成，X2=537.717，P=0.000<0.01，有显著统计学差异。CV16在普通组占优势，无死亡病例，EV71在重症组占优势。
2.4.病例数的年龄、性别分布
3286例手足口病例中，6岁以下共2990例，占全部病例的90.99%，綦江地区手足口病发病年龄集中在6岁以下。男性1875例，女性1411例，男女比为1.33：1。
2.5.死亡、重症与普通手足口病的年龄差异分析
3岁以下与3岁以上HFMD患儿在死亡、重症、普通组中分布的构成有显著差异，X2=78.248，P=0.000<0.01，重症患儿多见于3岁以下儿童。
3.讨论
手足口病是全球性传染病， 自1957年首次报道本病以来，全世界许多国家和地区，如澳大利亚、日本、匈牙利、马来西亚、新加坡、中国香港、中国台湾、中国内地等[4-6]。1998年我国台湾报道129106例，重症病人405 例，死亡78 例，大多数为5 岁以下儿童[7 ] ，并发症包括脑炎、无菌性脑膜炎、肺水肿、急性软瘫和心肌炎。2000年台湾又发生另一次爆发手足口病，80677患病和41人死亡[8]。綦江地区2013年我们收集到的3286例手足口病例其中5例死亡病例，115例重症病例给儿童的生命安全带来了严重的威胁，重症病例并发症主要是脑炎、无菌性脑膜炎引起。
手足口病的传播方式主要是通过密切接触、急性期病人的粪便、口腔分泌物及皮肤疱疹液中的病毒通过粪—口途径和呼吸道进入体内。接触污水或饮用被污染水源可经口传播。綦江地区2013年手足口病大部份是散发病例，和国内其它文献报道一致[1]，仅34例发生在同一幼儿园，因此不能忽视手足口病的聚集暴发，应引起幼儿园和小学关注。
参考文献：
[1]Schmidt NJ， Lennette EH， Ho HH. An apparentlt new enterovirus isolated from patients with disease of the central nervous system. J Infect Dis， 1974， 129：304-309
[2]金奇. 医学分子病毒学. 北京：科学出版社，2001
[3]中国卫生部，手足口病预防控制指南（2010版）
[4] Herreto LJ， Lee CSM， Hurrelbrink RJ， et al. Molecular epidemiology of enterovirus 71 in peninsular Malaysia ， 1997 -2000[J ] . Arch Virol， 2003， 148 ：1369 - 1376.
[5]Liu CC. An outbreak of enterovirus 71 infection in Taiwan ，1998 ： epidemiological and clinical manifestations[J ] . J ClinVirol， 2000， 17 ：23 - 30.
[6]陈立， 李秀珠， 张礼壁， 等. 一起引发手足口病流行的肠道病毒71 型的分子特征[J ]. 中国计划免疫，2003 ，9（5） ：283 - 287.
[7] HoM，Chen ER ，Hsu KH，et al . An epidemic of enterovirus 71 infection in Taiwan[J ] . N Engl J Med ， 1999 ，341（13） ：929- 935.
[8]Fujimoto T，Chikahira M，Yoshida S， et al. Outbreak of central nervous system disease associated with hand， foot， and mouth disease in Japan during the summer of 2000： detection and molecular epidemiology of enterovirus 71. Microbiol Immunol. 2002.46（9）：621-627.
【关键词】手足口病；儿童；肠道病毒71型；柯萨奇病毒16型
[Abstract] Objective： To study Epidemiology of children HFMD in Qijiang area using molecular biology methods. Methods： Collected 3286 cases of HFMD from January 2013 to December 2013 in Qijiang traditional Chinese Medicine Hospital and Qijiang People's Hospital， then tested EV71， CA16 and EV by PCR. Results： The total positive rate of human enterovirus was 61.72% with EV71， CA16， EV and other types each accounted for 29.4%， 53.21%， 0.91%， 16.39%. Total positive rate among four quarters had statistically significant differences （P < 0.01）. Pathogen categories infected between severe and common groups had significant difference （P < 0.01） . Conclusion： The main Pathogen of HFMD was CA16 in 2013 and the peak incidence occurred in June. EV71 infection might result in critically ill and all deaths cases were EV71 infection. Children with severe or death cases mainly were under the age of 3.
[Keywords ] HFMD； Children； EV71； CA16
【中图分类号】R4 【文献标识码】A 【文章编号】1671-8801（2015）03-0013-02
手足口病（Hand foot mouth disease ， HFMD） 是婴幼儿常见的传染病，由肠道病毒引起，临床上以发热和手、足、口腔等部位出现皮疹、溃疡等表现为主，个别患者可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等并发症[1，2]。
引起本病的肠道病毒有20 多种（型） 其中柯萨奇病毒（Coxasckievirus） A16 型（CoxA16） 和肠道病毒71 型（ Enterovirus71，EV71） 最常见[3]，2013年全国多个省份暴发儿童手足口病，綦江地区手足口病例数亦呈骤增趋势，我院儿童住院、门诊病例更是暴增，并出现死亡病例，手足口病治疗和预防任务十分艰巨，掌握綦江地区儿童手足口病的流行病学资料刻不容缓。
1.材料与方法
1.1.研究对象
收集2013年1月至2013年12月我院门诊及住院HFMD可疑患儿3286例，其中男1894例，1392例，年龄5个月-14岁3个月。其中死亡病例5例，重症病例115例，普通手足口病例3166例。全部病例诊断标准参考《手足口病预防控制指南（2010年）版》。同时收集、整理、分析病例资料。
1.2.试剂与仪器
实时荧光定量PCR仪为美国ABI 7500型、定性PCR仪为美国Bio-Rad C1000型，EV71型、CAl6型和肠道病毒通用型核酸检测试剂盒由中山大学达安基因股份有限公司提供。
1.3.样本采集
采集患儿病程3天内的粪便标本，粪便标本的采集量约30g/份，采集双份标本于无菌采便杯内，-80℃保存。
1.4. PCR检测
样本处理与一步法荧光定量RT—PCR检测参考说明书进行
1.5.统计学处理
SPSS13.0软件包进行，P<0.05差异有统计学意义。
2.结果
2.1.手足口病肠道病毒总阳性率及各病原体的构成
3286例手足口病例中，肠道病毒通用型（EV）2028例，肠道病毒总阳性率为61.72%。2028例肠道病毒阳性病例中，肠道病毒71型（EV71）598例，占29.49%；柯萨奇病毒16型（CA16）1079例，占53.21%；EV71和CA16混合感染18例，占0.91%；肠道病毒其它型332例，占16.39%。2013年綦江地区手足口病病原体感染以柯萨奇病毒16型（CA16）为主。 2.2.手足口病病例数、肠道病毒总阳性率及各病原体阳性率的季节分布
3286例手足口病例中，1-3月93例，阳性10例；4-6月1739例，阳性1245例；7-9月924例，阳性444例；10-12月530例，阳性329例，四个季度间病原体总阳性率卡方检验X2=1000.446，P=0.000<0.01，有显著统计学差异，綦江地区4-6月为手足口病暴发高峰期，同时阳性检出率最高。
2.3.死亡、重症与普通手足口病的病原体类别感染差异
5例死亡病例均检出EV71阳性，重症94例EV71阳性，重症组和普通组四种类别的感染有显著统计学差异，X2=629.887，P=0.000<0.01；EV71和CA16感染在重症组和普通组中的构成，X2=537.717，P=0.000<0.01，有显著统计学差异。CV16在普通组占优势，无死亡病例，EV71在重症组占优势。
2.4.病例数的年龄、性别分布
3286例手足口病例中，6岁以下共2990例，占全部病例的90.99%，綦江地区手足口病发病年龄集中在6岁以下。男性1875例，女性1411例，男女比为1.33：1。
2.5.死亡、重症与普通手足口病的年龄差异分析
3岁以下与3岁以上HFMD患儿在死亡、重症、普通组中分布的构成有显著差异，X2=78.248，P=0.000<0.01，重症患儿多见于3岁以下儿童。
3.讨论
手足口病是全球性传染病， 自1957年首次报道本病以来，全世界许多国家和地区，如澳大利亚、日本、匈牙利、马来西亚、新加坡、中国香港、中国台湾、中国内地等[4-6]。1998年我国台湾报道129106例，重症病人405 例，死亡78 例，大多数为5 岁以下儿童[7 ] ，并发症包括脑炎、无菌性脑膜炎、肺水肿、急性软瘫和心肌炎。2000年台湾又发生另一次爆发手足口病，80677患病和41人死亡[8]。綦江地区2013年我们收集到的3286例手足口病例其中5例死亡病例，115例重症病例给儿童的生命安全带来了严重的威胁，重症病例并发症主要是脑炎、无菌性脑膜炎引起。
手足口病的传播方式主要是通过密切接触、急性期病人的粪便、口腔分泌物及皮肤疱疹液中的病毒通过粪—口途径和呼吸道进入体内。接触污水或饮用被污染水源可经口传播。綦江地区2013年手足口病大部份是散发病例，和国内其它文献报道一致[1]，仅34例发生在同一幼儿园，因此不能忽视手足口病的聚集暴发，应引起幼儿园和小学关注。
参考文献：
[1]Schmidt NJ， Lennette EH， Ho HH. An apparentlt new enterovirus isolated from patients with disease of the central nervous system. J Infect Dis， 1974， 129：304-309
[2]金奇. 医学分子病毒学. 北京：科学出版社，2001
[3]中国卫生部，手足口病预防控制指南（2010版）
[4] Herreto LJ， Lee CSM， Hurrelbrink RJ， et al. Molecular epidemiology of enterovirus 71 in peninsular Malaysia ， 1997 -2000[J ] . Arch Virol， 2003， 148 ：1369 - 1376.
[5]Liu CC. An outbreak of enterovirus 71 infection in Taiwan ，1998 ： epidemiological and clinical manifestations[J ] . J ClinVirol， 2000， 17 ：23 - 30.
[6]陈立， 李秀珠， 张礼壁， 等. 一起引发手足口病流行的肠道病毒71 型的分子特征[J ]. 中国计划免疫，2003 ，9（5） ：283 - 287.
[7] HoM，Chen ER ，Hsu KH，et al . An epidemic of enterovirus 71 infection in Taiwan[J ] . N Engl J Med ， 1999 ，341（13） ：929- 935.
[8]Fujimoto T，Chikahira M，Yoshida S， et al. Outbreak of central nervous system disease associated with hand， foot， and mouth disease in Japan during the summer of 2000： detection and molecular epidemiology of enterovirus 71. Microbiol Immunol. 2002.46（9）：621-627.