【摘 要】
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背景：研究发现，内皮素参与了脊髓损伤后血脊髓屏障的破坏，干细胞来源外泌体可降低血脊髓屏障的通透性，修复脊髓损伤。目的：观察人脐带间充质干细胞来源外泌体是否可以通过抑制内皮素1表达降低血脊髓屏障的通透性，进而修复脊髓损伤。方法：用超速离心法从人脐带间充质干细胞培养上清液中提取外泌体，透射电子显微镜观察其形态，Western blot检测tsg101、CD63的表达。80只SD大鼠随机分成假手术组、模
【机 构】
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山西医科大学第三医院 ( 山西白求恩医院，山西医学科学院，同济山西医院 )
【基金项目】
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山西省自然科学基金（201901D111410）,项目负责人：关晓明； 山西白求恩医院优秀青年启动基金（2019YJ07）,项目负责人：关晓明；
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背景：研究发现，内皮素参与了脊髓损伤后血脊髓屏障的破坏，干细胞来源外泌体可降低血脊髓屏障的通透性，修复脊髓损伤。目的：观察人脐带间充质干细胞来源外泌体是否可以通过抑制内皮素1表达降低血脊髓屏障的通透性，进而修复脊髓损伤。方法：用超速离心法从人脐带间充质干细胞培养上清液中提取外泌体，透射电子显微镜观察其形态，Western blot检测tsg101、CD63的表达。80只SD大鼠随机分成假手术组、模型组、外泌体组、内皮素1组（n=20），采用改良Allen’s法制备大鼠脊髓损伤模型，内皮素1组用微量注射器直接向损伤部位注射10μL（1μg/mL）内皮素1，术后即刻及1,2 d，分别给予假手术组、模型组尾静脉注射200μL PBS，外泌体组、内皮素1组尾静脉注射200μL外泌体（200μg/mL）。脊髓损伤后第1,3,7,14,21天进行后肢运功功能评分；损伤后第7天通过伊文思蓝染色观察血脊髓屏障通透性，Western blot检测脊髓组织中紧密连接蛋白ZO-1、β-Catenin、Occludin和内皮素1的表达。结果与结论：（1）外泌体组BBB评分在损伤后3-21 d显著高于模型组（P ＜0.05），苏木精-伊红染色显示外泌体组脊髓损伤较模型组明显减轻；内皮素1组BBB评分较外泌体组显著降低（P ＜0.05），内皮素1组脊髓损伤较外泌体组加重；（2）模型组内皮素1表达量较假手术组显著增加（P＜0.05），外泌体组内皮素1表达量较模型组显著降低（P＜0.05）；（3）与模型组比较，外泌体组血脊髓屏障伊文思蓝渗出量显著减少（P＜0.05），紧密连接蛋白β-Catenin、Occludin、ZO-1的表达增加（P＜0.05）；与外泌体组比较，内皮素1组伊文思蓝渗出量显著增加（P＜0.05），上述紧密连接蛋白表达量显著减少（P ＜0.05）；（4）结果表明，人脐带间充质细胞来源外泌体通过下调内皮素1表达来保护血脊髓屏障的通透性，起到了修复脊髓损伤的作用。
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