【摘 要】
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背景磁激活细胞分选术(magnetic activated cell sorting,MACS)是一种新的免疫磁性分离技术.其原理是基于抗体对抗原的特异性识别,将50 nm磁性微珠直接或者间接耦联在抗体上,
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背景磁激活细胞分选术(magnetic activated cell sorting,MACS)是一种新的免疫磁性分离技术.其原理是基于抗体对抗原的特异性识别,将50 nm磁性微珠直接或者间接耦联在抗体上,与有相应抗原表达的细胞相连,在高强度、高梯度磁场中达到细胞磁性分离的目的.该法具有分离纯度和回收率均较高的优势,也能分离出体液中存在的少量肿瘤细胞.目的评价MACS联合一组肿瘤细胞标志物的方法对提高模拟恶性腹水中游离癌细胞检出效率的作用.方法 选择5种与恶性腹水病因有关的肿瘤细胞株作为研究对象,采用免疫荧光反应和流式细胞仪(FCM)检测上皮相关抗原(epithlial-related antigen,EpCAM)、CA125、癌胚抗原和TAG-72共4种单克隆抗体及其混合抗体在各肿瘤细胞的表达.将肿瘤细胞以不同比例掺入单个核细胞中模拟恶性腹水细胞成分,与联合单个抗体进行分选对比,观察MACS术联合混合抗体分选肿瘤细胞的效率.结果 FCM结果表明,混合抗体在5种肿瘤细胞的阳性表达率均高于4种抗体单独反应的阳性率.MACS术联合混合抗体检出模拟恶性腹水中肿瘤细胞的得率比联合单个抗体的得率要高,其中以2种胃癌细胞和结肠癌细胞的平均得率提高较多(分别为69.18%±20.84%比45.23%±11.54%、78.75%±15.42%比59.73%±16.64%和85.63%±12.30%比76.88%±8.65%),卵巢癌细胞次之(32.49%±3.58%比31.79%±4.82%),肝癌细胞最少(11.78%±0.43%比7.16%±0.46%).结论 与联合单个抗体进行分选相比,应用MACS术联合一组混合抗体的方法可有效提高恶性腹水中游离癌细胞的检出效率,尤其对胃肠道肿瘤所致的恶性腹水有潜在的临床应用价值.
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