重叠PCR克隆Exendin-4的基因及序列分析

来源 :中国医药导报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：liuyongqing0820

【摘要】

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目的克隆Exendin-4 39肽氨基酸序列基因编码区cDNA。方法根据Exendin-4氨基酸序列编码cDNA,设计正、负向引物/模板链,利用重叠延伸PCR法扩增出Exendin-4编码区基因DNA片段;将

【作者】

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王俊红郭永红张静徐静谢璇杨广笑王全颖王枫

【机构】

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西安交通大学医学院第二附属医院内分泌科.陕西西安710004,第四军医大学营养与食品卫生教研室,西安交通大学医学院第二附属医院感染科,西安华广生物工程有限公司.陕西西安710025

【出处】

：

中国医药导报

【发表日期】

：

2013年15期

【关键词】

：

EXENDIN-4 重叠延伸PCR 基因克隆 Exendin-4 Overlap extension PCR Gene clone

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目的克隆Exendin-4 39肽氨基酸序列基因编码区cDNA。方法根据Exendin-4氨基酸序列编码cDNA,设计正、负向引物/模板链,利用重叠延伸PCR法扩增出Exendin-4编码区基因DNA片段;将获得的基因片段插入pGEM-T-Easy质粒中;转化到大肠杆菌DH5α后挑选阳性克隆,利用限制性内切酶及核苷酸序列分析技术鉴定重组质粒。结果经质粒DNA酶切分析及序列测定,获得了Exendin-4 DNA片段序列。结论本研究成功克隆了Exendin-4 cDNA,为下一步构建Exendin-4真核表达

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