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【目的】探讨内镜超声引导下细针穿刺（endoscopic ultrasonography guided fine needle aspiration ， EUS‐FNA）细胞学检查在上消化道旁占位疾病中的诊断价值。【方法】选择本院影像学检查（CT 或MRI）诊断为上消化道旁占位病变，且行EUS‐FNA细胞学检查的患者53例，以术后病理组织学诊断结果为金标准，对比EUS‐FNA细胞学诊断与术后组织学诊断结果。【结果】53例患者EUS‐FNA细胞学确诊为肿瘤的20例，其中4例为间质瘤，16例为腺癌（其中1例为粘液腺癌）；其中6例结合免疫组织化学检测技术辅助诊断，均与病理组织学诊断一致。EUS‐FNA细胞学确诊为非肿瘤（炎症、增生、囊肿及结核）的33例，病理组织学诊断非肿瘤30例，3例为肿瘤，其中2例胰腺占位病变术后诊断为胰腺导管高分化腺癌，1例胃肠道占位病变术后诊断为间质瘤。EUS‐FNA细胞学检查对上消化道旁占位病变的诊断准确率为943．4％（50／53），敏感性为869．6％（20／23），特异性为100％（30／30），阳性预测值100％（20／20），阴性预测值909．1（30／33）。【结论】EUS‐FNA 细胞学检查对上消化道旁占位病变具有较高的诊断价值，在某些难以获取组织标本诊断的情况下该检查更适用且无可替代。