【摘 要】
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目的 探讨长链非编码RNA SNHG7(LncRNA SNHG7)对小鼠心肌梗死后心肌细胞损伤的保护作用及其可能作用机制.方法 建立小鼠心肌梗死模型,采用慢病毒方法构建携带SNHG7过表达的慢病毒与携带绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒空载体,随机分为假手术组、模型组、空载组、SNHG7过表达组;缺氧/缺血诱导H9C2细胞建立细胞损伤模型;将正常培养的心肌细胞作为Con组,将缺氧缺血处理的心肌细胞作为缺氧组.采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测心肌组织及H9C2细胞中SNHG7、微小RNA-2
【机 构】
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枣庄矿业集团枣庄医院 山东枣庄 277100
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目的 探讨长链非编码RNA SNHG7(LncRNA SNHG7)对小鼠心肌梗死后心肌细胞损伤的保护作用及其可能作用机制.方法 建立小鼠心肌梗死模型,采用慢病毒方法构建携带SNHG7过表达的慢病毒与携带绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒空载体,随机分为假手术组、模型组、空载组、SNHG7过表达组;缺氧/缺血诱导H9C2细胞建立细胞损伤模型;将正常培养的心肌细胞作为Con组,将缺氧缺血处理的心肌细胞作为缺氧组.采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测心肌组织及H9C2细胞中SNHG7、微小RNA-223(miR-223)的表达量;采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡;采用qRT-PCR法检测心肌组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA的表达量;双荧光素酶报告实验检测SNHG7、miR-223的靶向关系;蛋白质印迹法(Western Blot)检测脂肪酸合成酶(Fas)、Cleaved Caspase-3蛋白表达量.结果 与假手术组比较,模型组SNHG7表达水平明显降低(P<0.05),凋亡指数及Fas、Cleaved Caspase-3蛋白水平明显升高(P<0.05),TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA表达水平明显升高(P<0.05),SNHG7过表达对细胞凋亡及炎性因子水平的影响与此相反(P<0.05);与Con组比较,缺氧/缺血诱导H9C2细胞SNHG7的表达水平明显降低(P<0.05),miR-223表达水平明显升高(P<0.05).双荧光素酶报告实验证实SNHG7可靶向结合miR-223,并可负向调控miR-223的表达.结论 SNHG7过表达可能通过下调miR-223表达而抑制小鼠心肌梗死后心肌细胞凋亡及炎症反应从而减轻心肌细胞损伤.
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