p16基因的原核表达及抗P16抗血清的制备

来源 :生物技术通讯 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yangzhibo0508

【摘要】

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采用基因重租技术,将野生型p16 cDNA通过中间载体pVL1392最后载入表达载体pGEX-5T,IPTG诱导重组质粒转化的大肠杆菌,蛋白质印迹证实42×10~3的融合蛋白GST-P16的表达。表

【作者】

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覃林花黄长晖傅继梁

【机构】

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第二军医大学医学分子遗传学军队重点实验室,诲军411医院消化实验室

【出处】

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生物技术通讯

【发表日期】

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1998年3期

【关键词】

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p16基因(CDKN2) 原核表达蛋白免疫 p16 gene (CDKN2) prokaryotic expression protein immuniz

【基金项目】

：

国家自然科学基金(项目号 39670400)

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采用基因重租技术,将野生型p16 cDNA通过中间载体pVL1392最后载入表达载体pGEX-5T,IPTG诱导重组质粒转化的大肠杆菌,蛋白质印迹证实42×10~3的融合蛋白GST-P16的表达。表达了GST-P16的重组菌经加热破菌后行SDS-PAGE,将GST-P16蛋白条带切下后经反复冻融于皮内多点注射免疫家兔。所收获的兔血清经蛋白质印迹法检测到抗P16抗体滴度为1:625。结果表明通过pGEX-5T融合蛋白表达系统能方便地提供制备抗P16抗血清的免疫原,该免疫原未经纯化并未影响抗P16抗

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