CYP2B6基因表达质粒的构建及在大肠杆菌中的表达

来源 :汕头大学医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jackfang999
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目的:构建CYP2B6基因原核表达质粒,在大肠杆菌[Rosetta2(DE3)pLysS]中高效表达重组蛋白。方法:以质粒为模板,用PCR技术扩增出CYP2B6基因,并将其分别插入pET-22b(+)、pET-28b(+)和pET-32a(+)质粒中,经PCR、测序鉴定后,转化Roseaa2(DE3)pLysS,并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。结果:经PCR、测序鉴定,构建了CYP2B6基因表达质粒;采用考马斯亮蓝染色法检测重组蛋白表达,pET-22b(+)-CYP2B6未见目的蛋白
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