重组嘧啶核苷磷酸化酶工程菌菌种的稳定性考察

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目的研究基因工程菌E.coliTOP10F’在LB培养基中传代50代过程中菌种的稳定性。方法以菌体和菌落的形态、质粒稳定性(ST)、质粒酶切图谱和重组嘧啶核苷磷酸化酶(PyNPase)的表达量和酶活性为指标进行考察,以评价工程菌的稳定性。结果重组PyNPase工程菌在传代50代的过程中质粒稳定性高,传代10代内质粒稳定性(ST)为100%,其表达产物可达发酵液总蛋白的20%,其活性为1.18 U·ml^-1,传代50代的菌体与菌落呈典型的大肠杆菌形态。结论重组嘧啶核苷磷酸化酶工程菌菌种稳定。
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