研究miR-139-5p靶向转化生长因子(TGF)-β1调控上皮间质转化(EMT)相关信号通路抑制肝癌细胞侵袭转移的分子机制。
方法首先通过生物信息学方法，发现miR-139-5p是TGF-β1的最佳靶miRNA。在56例肝癌组织和20例癌旁组织中，通过免疫组化和蛋白印迹检测TGF-β1的表达水平；通过实时荧光定量(qRT)-PCR检测miR-139-5p表达，分析两者之间的相关性。在高转移和低转移的肝癌细胞株中，qRT-PCR检测miR-139-5p表达，蛋白印迹检测TGF-β1、N-cadherin、Vimentin表达，分析miR-139-5p与上述三个蛋白之间的关系。在重组细胞株中，用qRT-PCR检测miR-139-5p的表达，蛋白印迹检测TGF-β1的表达，分析miR-139-5p表达是否与TGF-β1相关；Transwell方法检测miR-139-5p表达改变对肝癌重组细胞系侵袭能力的影响。
结果生物信息学发现有20个miRNAs可与TGF-β1结合。其中miR-139-5p是与TGF-β1结合最稳定，且特异性最好的首选靶miRNA。肝癌组织中TGF-β1表达阳性率为80.4%(45/56)，癌旁正常肝组织中表达阳性率为15.0%(3/20)，两者差异有显著性统计学意义(P<0.05)。肝癌组织中miR-139-5p与TGF-β1的表达呈负相关。TGF-β1、N-cadherin、Vimentin三个蛋白的表达水平在不同转移细胞系中差异显著(P<0.05)。转染miR-139-5p可下调肝癌细胞TGF-β1的表达，miR-139-5p可与TGF-β1的UTR位点结合。miR-139-5p高表达细胞株侵袭细胞计数为(53±4)个/高倍视野，明显低于其他三组(P<0.05)。
结论miRNA-139-5p可通过靶向结合TGF-β1，调控EMT信号通路，抑制肝癌细胞的侵袭转移。