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目的
研究临床分离肺炎克雷伯菌对醋酸氯己定消毒剂的耐药性、耐药机制及分子流行病学情况。
方法收集2015年温州医科大学附属第一医院临床分离的肺炎克雷伯菌共332株，琼脂稀释法筛选醋酸氯己定耐药菌株并检测外排泵抑制剂羰基氰氯苯腙(CCCP)对醋酸氯己定最小抑菌浓度(MIC)的影响；聚合酶链反应(PCR)和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分别检测与醋酸氯己定抗性相关的外排泵基因cepA、qacE、qacΔE1的携带情况和表达情况；半定量结晶紫法检测生物膜形成能力；多位点序列分型(MLST)和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析醋酸氯己定耐药菌株间的同源性。
结果25株醋酸氯己定耐药肺炎克雷伯菌在加入CCCP后的醋酸氯己定MIC值比加入之前的MIC值均降低4倍及以上；醋酸氯己定抗性基因cepA、qacE和qacΔE1的携带率分别为100%、40%和40%，且醋酸氯己定耐药组的上述基因表达水平均显著高于敏感组；醋酸氯己定耐药菌株的生物膜形成能力显著低于醋酸氯己定敏感菌株，其中，成膜能力阴性4株(16%)，弱阳性20株(80%)，阳性1株(4%)；MLST和PFGE显示25株醋酸氯己定耐药菌株分别属于19种ST型和各种不同PFGE型。
结论主动外排是肺炎克雷伯菌对醋酸氯己定消毒剂耐药的主要机制；醋酸氯己定耐药肺炎克雷伯菌具有不同程度的生物膜形成能力；耐药菌株的同源性较低。