【摘 要】
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目的构建人miR-26b慢病毒表达载体,并检测其在人前体脂肪细胞中过表达效果。方法以人脂肪细胞基因组DNA为模板,PCR扩增包含miR-26b所在区域上下游100bp左右的基因组DNA,克隆
【机 构】
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南京医科大学公共卫生学院; 中国人民解放军第82医院检验科; 南京医科大学儿科研究所; 南京医科大学第一附属医院; 南京医科大学附属南京妇幼保健院;
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划(2013CB530604);国家自然科学基金(81170797);江苏省自然科学基金(BK2011107);江苏省医学创新团队项目(LJ201108);南京市科技发展计划(201104013);江苏省研究生培养创新工程(CXLX12_0559);蚌埠医学院科研课题项目(Byky1262NF);军区医学科技创新课题项目(12MA025)
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目的构建人miR-26b慢病毒表达载体,并检测其在人前体脂肪细胞中过表达效果。方法以人脂肪细胞基因组DNA为模板,PCR扩增包含miR-26b所在区域上下游100bp左右的基因组DNA,克隆慢病毒表达载体,进一步包装成慢病毒并感染人脂肪细胞,荧光定量PCR检测miR-26b表达。结果成功构建miR-26b慢病毒载体,病毒感染效率为75%左右,miR-26b过表达效率达2倍以上。结论成功构建了miR-26b慢病毒表达载体,可用于研究miR-26b在人脂肪细胞中的分子机制。
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