【摘 要】
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目的 探讨TRPC通道在缺氧胶质瘤细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达中的作用.方法 将体外培养的U87细胞分为常氧对照组、常氧+25 μmol/L SKF96365组、常氧+40 μmol/LSKF96365
【机 构】
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南方医科大学公共卫生与热带医学学院职业卫生与职业医学系,南方医科大学南方医院惠侨科
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目的 探讨TRPC通道在缺氧胶质瘤细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达中的作用.方法 将体外培养的U87细胞分为常氧对照组、常氧+25 μmol/L SKF96365组、常氧+40 μmol/LSKF96365组、缺氧组、缺氧+25 μmol/L SKF96365组、缺氧+40 μmol/L SKF96365组,34 h加入后不同浓度的SKF96365,常氧对照组和缺氧组加入等量溶剂,继续培养2h后后3组细胞更换为低氧培养基,培养10h后实时RT-PCR检测各组细胞VEGF mRNA的表达；培养16h后RT-PCR和Westem blotting分别检测常氧对照组和缺氧组TRPC1 mRNA、蛋白的表达；培养1h后免疫荧光染色检测常氧对照组和缺氧组TRPC定位的变化. 结果 各组细胞缺氧条件下培养10h,VEGFmRNA表达量差异有统计学意义(F=101.362,P=0.000),缺氧组VEGF mRNA表达量较常氧对照组增加,差异有统计学意义(P＜0.05),与缺氧组比较,缺氧+25 μmol/L SKF96365组、缺氧+40 μmol/LSKF96365组细胞VEGFmRNA表达下降,差异有统计学意义(P＜0.05).缺氧16h后,缺氧组TRPC1 mRNA、蛋白的表达较常氧对照组无显著变化,差异无统计学意义(t=0.493,P=0.648；t=0.490,P=0.650).免疫荧光染色显示常氧对照组TRPC1主要存在于细胞胞浆和胞膜,缺氧1h后TRPC1蛋白发生转位改变,聚集于胞膜位置. 结论 缺氧条件下,胶质瘤细胞TRPC1通道发生质膜转位而被激活,从而参与VEGF表达的调控.
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