【摘 要】
：
为了建立一种灵敏、特异、快速的山羊痘病毒实时定量检测方法,根据山羊痘病毒(AY077835)gp006基因序列,应用Beacon Designer 7.7软件设计合成一对PCR引物.将被检测的目的DNA
【机 构】
：
云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室,云南省丽江市华坪县畜牧兽医站,云南省普洱市动物疫病预防控制中心
【基金项目】
：
云南省科技厅农业科技创新工程项目;
论文部分内容阅读
为了建立一种灵敏、特异、快速的山羊痘病毒实时定量检测方法,根据山羊痘病毒(AY077835)gp006基因序列,应用Beacon Designer 7.7软件设计合成一对PCR引物.将被检测的目的DNA片段克隆PEASY-T1质粒,制备重组质粒标准品,以期建立以质粒拷贝数为单位的标准曲线.通过反应条件的优化及引物浓度的筛选,建立了山羊痘病毒SYBR Green Ⅰ实时定量PCR(real-time PCR)检测方法,最佳引物浓度为400 nmol/L.组内重复试验和组间重复试验变异系数均低于2％,最低检测限为1×101 copies/μL,上机检测时间在1h以内.用该方法对2011年流行于云南华坪、景谷及2003年流行于云南宣威、寻甸和昆明的山羊痘临床组织样品进行定量检测,结果送检组织样品抽提DNA中病毒含量分别为1.03×105、5.30×103、1.51×104、4.74×103、7.20×104 copies/μL.结果表明,所建立的real-time PCR具有灵敏、特异、快速的特点,适合于山羊痘临床组织样品的定量检测.
其他文献
为了更好地指导栾川县东部新区的开发建设，加强对片区的整体规划控制和引导，科学、合理地构建洛阳栾川新区地块空间环境体系，为城市规划管理和建设用地的综合开发提供依据，并指导
建筑市场的激烈竞争和工程施工的特点导致当前大部分施工企业都面临着施工利润薄风险大、工程款拖欠、施工索赔等问题，文章从施工企业加强内部合同管理与严把外部合同签定关两
本文主要论述了农用土地整理生态效益的主要理念，针对农村土地的整理生态效益提出了如何进行评价边界的确定、实际评价的具体指标以及具体的评价方式的选用等等方面提出了一些
阅读是一个世界性话题，已上升为国家工程。图书馆阅读、推广、普及阅读责无旁贷。在分析我国全民阅读活动现状的基础上，提出有计划地开展阅读推广工作既是公共图书馆的一项重要
目的 探讨钢板与髓内钉两种内固定方式在江西省的应用现状与疗效差异.方法 回顾性分析江西省5家三甲医院于2007年1月至2009年12月收治且获得随访的390例(410侧)股骨干骨折患
随着经济的发展和社会的进步，新会计制度改革不断深入，这给事业单位财会工作带来了新的挑战，本文首先分析了新会计制度的特点，重点分析了新会计制度对事业单位财会工作的影响，继而
项目投标一般分为两个阶段：①资格审查阶段（一般分为资格预审和资格后审）；②投标阶段。
目前，我国电力企业的整体水平在市场经济迅速发展的形势下不断进步，成为了社会经济发展当中的亮点。为了与社会主义市场经济发展要求相适应，电力企业开始注重提升和改进成本管理
泛北部湾经济合作是在中国—东盟自由贸易区框架下开展的次区域经济合作,其合作方式包括跨境经济合作区、共建产业园区、点式项目合作等模式。跨境经济合作区是一种新型的国
目的：探究肝性脑病患者护理过程中存在的不安全因素与解决策略。方法：从我院在2011年6月-2011年12月半年内共收治的400例肝硬化患者随机抽取208例，对患者不安全因素及对策进行回