微小RNA-200c逆转人胰腺癌干细胞化疗耐药的研究

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bianhao9527
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的

观察微小RNA-200c(miR-200c)在逆转人胰腺癌干细胞化疗耐药中的作用。

方法

应用流式细胞术(FACS)在人胰腺癌细胞株PANC-1中分选出以CD24+ CD44+ ESA+作为标志物的胰腺癌干细胞。将miR-200c前体片段和阴性对照片段分别转染到胰腺癌干细胞中。应用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测细胞中miR-200c的表达。噻唑蓝(MTT)法检测细胞对吉西他滨的敏感度。

结果

人胰腺癌细胞株PANC-1中分选出CD24+ CD44+ ESA+细胞(0.8%)。miR-200c在胰腺癌干细胞中的相对表达量(0.15±0.01)显著低于PANC-1细胞(1.00±0.09)(P< 0.05)。吉西他滨对胰腺癌干细胞的半数抑制浓度[IC50,(19.15±1.53)μmol/L]明显高于PANC-1细胞[(0.86±0.18)μmol/L,P< 0.05]。转染miR-200c前体片段24 h后的胰腺癌干细胞中miR-200c的相对表达值(3.70±0.42)明显高于转染阴性对照片段的干细胞(0.22±0.21, P< 0.05)。吉西他滨对转染miR-200c前体片段后的胰腺癌干细胞IC50值[(0.92±0.13)μmol/L]显著低于转染阴性对照片段的干细胞[(17.94±1.36)μmol/L,P< 0.05]。

结论

miR-200c可以增强胰腺癌干细胞对吉西他滨的化疗敏感性,具有逆转其化疗耐药的作用。

其他文献
目的观察脂多糖(LPS)协同转化生长因子-β1(TGF-β1)作用于乳腺癌MCF-7细胞的生物学效应,并探讨其分子生物学机制。方法倒置显微镜下观察细胞形态;罗丹明-鬼笔环肽标记细胞骨架;实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、转录因子Snail、Twist以及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的基因表达水平;Trans
目的检测S100钙结合蛋白A13(S100A13)和人成纤维细胞生长因子-1(FGF-1)在甲状腺癌、甲状腺腺瘤、正常甲状腺组织中的表达,探讨两者与甲状腺癌发生发展的关系。方法采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)方法检测甲状腺癌、甲状腺腺瘤、正常甲状腺组织中两者的表达,比较两者在两种不同组织中的表达。结果甲状腺癌组织中,S100A13的表达阳性率为93. 3%(56/60),在甲
目的观察微小RNA-19b(miRNA,miR-19b)在大鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)中的表达变化及其对腺泡细胞坏死的作用。方法建立ANP模型:接种AR42J细胞1×105个/孔于24孔板,24 h后加入200μm/L牛磺石胆酸-3-硫酸酯二钠盐(TLC-S),1 h后检测淀粉酶和miR-19b表达量。病毒转染及分组:转染腺病毒介导miR-19b模拟物(mimic)为mimic组,转染miRNA
期刊
目的探讨丙泊酚对肺癌A549细胞凋亡的影响及其机制。方法用噻唑蓝(MTT)法检测丙泊酚对肺癌A549细胞增殖作用的影响,采用流式细胞技术检测丙泊酚对A549细胞细胞凋亡的影响,Western blot测定丙泊酚对A549细胞水通道蛋白1(AQP1)表达的影响,应用Transwell小室实验检测AQP1蛋白表达对肺癌A549细胞迁移的影响。结果MTT法和流式细胞法显示不同浓度丙泊酚作用A549细胞株
目的观察纤维蛋白原β(FGB)启动子区单倍型对特发型下肢深静脉血栓(IDVT)的影响。方法IDVT组及健康对照组各120例。采用启动子区完整测序技术及聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)双重检测纤维蛋白原β链基因启动子区-1 420G/A、-993C/T、-854G/A、-455G/A、-249C/T和-148C/T单核苷酸多态性(SNP)及基因型,对上述SNP连锁不平衡分析并构
目的探讨全反式维甲酸(ATRA)促进结直肠癌肿瘤干细胞分化的作用及其机制。方法采用磁珠分选法从结直肠癌细胞株SW620细胞中分选出CD133+细胞,并用流式细胞仪检测1.0×10-6 mol/L ATRA处理3 d后CD133+细胞比例的变化。采用成球实验观察1.0×10-6 mol/L ATRA对结直肠癌干细胞处理后自我更新能力的影响。采用Western blot法检测1.0× 10-6 mol
目的观察连翘对内毒素(ET)作用下大鼠脾脏淋巴细胞Toll样受体4(TLR4)、核因子-κB(NF-κB)、白细胞介素(IL)-6及IL-10的影响,探讨其抗炎及免疫调节的作用。方法无菌操作分离大鼠脾脏,制备脾脏淋巴细胞并用含20%胎牛血清的DMEM培养基培养,分为对照组(Control)、ET组、连翘高、中、低剂量组[连翘水煎液(AFS)1+ ET、AFS2+ ET、AFS3+ ET]及多黏菌素
期刊
目的观察重组血管内皮抑素(Endostar)对人食管癌细胞株EC9706细胞体外生长及对乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法采用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度(12. 5、25. 0、50. 0、100. 0、200. 0μg/L)Endostar对EC9706细胞增殖24、48、72 h的抑制率;免疫细胞化学和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)实验分