Q热贝纳柯克斯体SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立

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根据Q热贝纳柯克斯体(Coxiella burnetii)插入序列IS1111序列设计引物,建立快速检测Q热的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法.以梯度稀释的含有目的扩增片段的重组质粒作为标准品,进行定量PCR反应.结果显示,该方法能检测出102个拷贝数的阳性质粒.标准曲线相关系数为0.991,扩增效率为98%.对结核分支杆菌、衣原体、布鲁氏杆菌及牛血液的核酸样品的特异性检测结果均为阴性.结果表明本研究建立的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR法灵敏度高且特异性好,可用于临床检测.
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