【摘 要】
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用建立表达性文库的方法,构建了Eimeriatenella孢子化卵囊噬菌体ZAP表达性cDNA文库.首先用TRlzol试剂盒从E.tenella孢子化卵囊中提取总RNA,再用Oligo(dT)12-纤维素柱从总RNA
【机 构】
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中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所
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用建立表达性文库的方法,构建了Eimeriatenella孢子化卵囊噬菌体ZAP表达性cDNA文库.首先用TRlzol试剂盒从E.tenella孢子化卵囊中提取总RNA,再用Oligo(dT)12-纤维素柱从总RNA中分离mRNA,以mRNA为模板,Oligo(dT)18Linker-Primer为引物,反转录合成cDNA第一链,再在DNA聚合酶Ⅰ作用下置换合成第二链cDNA.cDNA第二链合成后用Pfu DNA聚合酶补平Xho Ⅰ位点,再与EcoR Ⅰ Adapters连接,经Xho Ⅰ酶切后,凝胶电泳
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