探讨micro RNA(miRNA)与肝外门静脉梗阻患儿蛋白C减少的关系。
方法回顾性研究2013年12月至2016年4月于首都儿科研究所普外科接受Rex手术治疗和术后定期随访复查的53例肝外门静脉梗阻患儿(男32例，女21例；术时年龄0.9～12.6岁，平均6.1岁)手术前、后的血液样本。收集同期收治的18例腹股沟斜疝儿童(均为男孩；年龄2～9岁，平均3.6岁)的术前血液样本作为对照组1。采用ELISA法检测两组样本中的蛋白C浓度，并比较其差异。再以Rex术前后蛋白C浓度低于对照组1并排除因门静脉入肝血流减少引发的继发性蛋白C减少和遗传性蛋白C缺乏的肝外门静脉梗阻患儿的全血样本为研究组。另收集相应数量的腹股沟斜疝儿童术前血液样本为对照组2。采用ELISA检测两组(研究组和对照组2)血液中活化蛋白C(activated Protein C，APC)相对含量，并比较两组差异。进而，采用qRT-PCR检测两组血浆中miR-204-5p、miR-211-5p、miR-218-5p、miR-802、miR-124-3p、miR-506-3p和蛋白C mRNA的相对含量，比较两组间的差异。对研究组的miR-204-5p、miR-211-5p、miR-218-5p、miR-802、miR-124-3p、miR-506-3p和蛋白C mRNA的表达进行Pearson相关性分析。
结果6例EHPVO患儿(男4例，女2例；术时年龄3.1～12.6岁，平均5.2岁)Rex术前、后蛋白C浓度均低于对照组1(术前4.30～4.68 μg/ml，平均4.50 μg/ml；术后4.08～4.97 μg/ml，平均4.48 μg/ml；对照组15.03～6.22 μg/ml，平均5.52 μg/ml)。为进一步进行基因研究，将该6例EHPVO患儿Rex术后血液样本作为研究组，新收集的6例腹股沟斜疝儿童(均为男孩；年龄2～5岁，平均4.2岁)术前血液样本作为对照组2。研究组APC含量为(4 102.33±154.35)pg/ml显著低于对照组2(5 357.42±479.49)pg/ml，组间比较，差异有统计学意义(P<0.01)。研究组的miR-124-3p和miR-506-3p的相对含量分别为17.98±5.32和7.03±5.05显著高于对照组2的1.14±0.61和1.31±0.93，组间比较，差异有统计学意义(P<0.05)。研究组的蛋白C mRNA的相对含量为0.05±0.03显著低于对照组2的2.44±2.63，组间比较，差异有统计学意义(P<0.05)。研究组中miR-211-5p、miR-802、miR-124-3p和miR-506-3p的表达与蛋白C mRNA的表达有显著负相关性(P<0.05)。
结论miR-124-3p和miR-506-3p与小儿肝外门静脉梗阻蛋白C减少有显著的相关关系，可能在引发蛋白C减少中有重要作用。