shRNA-SIVA1慢病毒载体的构建及其对胃癌细胞耐药性的影响

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目的构建shRNA SIVA1慢病毒表达载体,研究其对胃癌SGC 7901/DDP细胞耐药性和增殖的影响以及可能的机制。方法根据GenBank数据库提供的SIVA1基因序列,设计3条SIVA1靶点干扰序列;引物退火形成双链DNA,与经过双酶切的线性化GV493载体连接并转化;在293T细胞中进行病毒包装并测定病毒滴度;将重组慢病毒转染人胃癌SGC 7901/DDP细胞,qRT PCR和Western blot检测细胞SIVA1 mRNA和蛋白表达水平,CCK 8法检测细胞对顺铂(DDP)的敏感性变化以及细
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