【摘 要】
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为研究S.pombeRNA polⅡ各亚基间体内装配成复合体的机制,本文首次用酵母双杂交系统鉴定了Rpb2和Rpb3两亚基间体内相互作用的位点.首先将Rpb2的4个片段克隆至Gal4 BD表达载体
【机 构】
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浙江大学肿瘤学研究所,哈尔滨医科大学微生物学教研室
【基金项目】
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日中医学协会笹川医学奖学金，国家自然科学基金
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为研究S.pombeRNA polⅡ各亚基间体内装配成复合体的机制,本文首次用酵母双杂交系统鉴定了Rpb2和Rpb3两亚基间体内相互作用的位点.首先将Rpb2的4个片段克隆至Gal4 BD表达载体pAS2上,构建BD-Rpb2片段融合蛋白重组质粒;同时将Rpb3克隆至Gal4AD表达载体pGADGH上,构建AD-Rpb3融合蛋白重组质粒.其次,将pGADGHRpb3分别与pAS2Rpb2各片段重组质粒共转化到受体酵母菌Y190感受态细胞内,筛选并鉴定β-gal活性阳性(β-gal+)的共转化子.最后,将β
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