【摘 要】
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目的:研究哺乳动物不育系20样激酶1(Mst1)减轻小鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的作用及机制.方法:以野生型C57BL/6小鼠(WT)和全身性Mst1敲除小鼠(Mst1-/-)为实验对象,构建蛋氨
【机 构】
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上海中医药大学附属第七人民医院胃肠疾病诊疗部,上海 200137
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目的:研究哺乳动物不育系20样激酶1(Mst1)减轻小鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的作用及机制.方法:以野生型C57BL/6小鼠(WT)和全身性Mst1敲除小鼠(Mst1-/-)为实验对象,构建蛋氨酸-胆碱缺乏(MCD)饮食诱导的小鼠NASH模型,并以蛋氨酸-胆碱充足(MCS)饲料为对照.饲料干预4周后,取血,收集肝组织.全自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平;试剂盒检测肝组织总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)活性;行特殊染色后光镜下观察肝组织形态学变化;免疫组化检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;PCR检测肝组织炎症因子白介素1 β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)、趋化因子CCL-2的mRNA表达水平;Western blot检测Nod样受体蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、剪切型天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1(cleaved-Caspase-1)的蛋白表达.结果:MCD饮食诱导4周后,与野生型小鼠(WT+MCD)相比,Mst1敲除小鼠(Mst1-/-+MCD)血清ALT、AST水平及肝组织TC、TG含量明显降低(P＜0.01);病理染色观察显示,Mst1敲除小鼠肝细胞脂肪空泡减少,炎症细胞浸润及肝脏纤维化明显减轻;进一步检测发现,Mst1敲除小鼠肝组织SOD活性明显升高(P＜0.01),MDA含量明显下降(P＜0.01),同时肝组织炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-6和CCL-2的mRNA表达水平明显降低(P＜0.05,P＜0.01),NLRP3、ASC 和 cleaved-Caspase-1 的蛋白表达水平显著下调(P＜0.05,P＜0.01).结论:Mst1 缺乏能够减轻MCD饮食诱导的NASH小鼠肝损伤,其作用机制可能与增强肝细胞抗氧化能力、抑制肝脏NLRP3炎症小体活化有关.
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