【摘 要】
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目的:探究骨桥蛋白(osteopontin,OPN)在抑制小鼠宫腔粘连(intrauterine adhesions,IUA)后纤维化中的作用.方法:分离培养C57 BI/6小鼠和OPN-/-C57 BL/6小鼠的原代骨髓间充质于细胞(mesenchymal stem cells,MSCs);利用流式细胞仪检测分离的细胞表面抗原.将30只雌性小鼠随机分为假手术组、模型组、OPN-/-MSCs组、MSCs组、溶剂组,每组6只.造模1周后,将MSCs、OPN-/-MSCs分别注射至小鼠左右宫角;治疗结束2周后
【机 构】
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中山大学附属第六医院生殖医学中心,广州510000
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目的:探究骨桥蛋白(osteopontin,OPN)在抑制小鼠宫腔粘连(intrauterine adhesions,IUA)后纤维化中的作用.方法:分离培养C57 BI/6小鼠和OPN-/-C57 BL/6小鼠的原代骨髓间充质于细胞(mesenchymal stem cells,MSCs);利用流式细胞仪检测分离的细胞表面抗原.将30只雌性小鼠随机分为假手术组、模型组、OPN-/-MSCs组、MSCs组、溶剂组,每组6只.造模1周后,将MSCs、OPN-/-MSCs分别注射至小鼠左右宫角;治疗结束2周后,二维超声诊断小鼠子宫形态,HE染色和Masson染色检测子宫组织内膜形态变化及纤维化情况,免疫组化染色检测α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达,Westem blot检测转化生长因子-β1 (transforming growth factor-β1,TGF-β1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、I型胶原α1(type I collagen α1,COL1A1)、Ⅲ型胶原α1 (type Ⅲ collagen α1,COL3A1)蛋白表达.结果:成功分离并培养得到MSCs与OPN-/-MSCs细胞,且在2组细胞中均检测到CD29、CD44和CD90呈阳性表达,CD34呈阴性表达.与模型组比较,OPN-/-MSCs组和MSCs组子宫形态病变得到改善,腺体数目不同程度增多,纤维化面积有所减少,α-SMA表达明显下降(P=0.000),子宫组织中TGF-β1、VEGF、COL1A1及COL3A1蛋白表达水平均明显下降(均P=0.000).与OPN-/-MSCs组比较,MSCs组子宫形态改善更为明显,腺体数目增多,而纤维化面积减少,α-SMA表达明显下降(P=0.000),子宫组织中TGF-β1、VEGF、COL1A1及COL3A1蛋白表达水平也明显下降(均P=0.000).结论:MSCs比OPN-/-MSCs注射宫腔粘连小鼠后抑制宫腔粘连内膜纤维化的作用更明显,表明OPN具有调控MSCs抑制小鼠宫腔粘连内膜纤维化的作用.
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