犬细小病毒VP2基因的原核表达及间接ELISA方法的建立

来源 :中国兽医科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:woshi19891
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根据GenBank上发表的犬细小病毒(CPV)VP2蛋白基因序列,设计并合成1对引物,通过PCR扩增VP2基因全长。将其克隆到pET一30a载体中,构建了原核表达载体pET—VP2,转化大肠杆菌Rosetta,表达并纯化了重组蛋白,Western—blotting证明该重组蛋白具有免疫原性。利用重组蛋白为抗原,通过方阵试验确定了包被抗原的最佳包被量为15.8ng/孔,血清的最佳稀释倍数为1:100,建立了检测CPV血清抗体的间接ELISA方法。
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