【摘 要】
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参照国外已发表的M41高可变区S1序列设计一对引物,跨度为1.7kb左右.采用差速离心法浓缩病毒,提取病毒RNA,经RT-PCR扩增,得到与设计同样大小的PCR DNA片段,将PCR产物纯化,与质
【机 构】
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山东省质量技术监督局,山东省农业科学院,山东农业大学
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参照国外已发表的M41高可变区S1序列设计一对引物,跨度为1.7kb左右.采用差速离心法浓缩病毒,提取病毒RNA,经RT-PCR扩增,得到与设计同样大小的PCR DNA片段,将PCR产物纯化,与质粒载体(pGEM-TEasy Vector)连接,并转入大肠杆菌JM109,获取阳性克隆.增菌培养后用小量碱提取法提取质粒,利用PCR扩增法与EcoR I酶切分析进行鉴定.对阳性质粒DNA进行测序,利用Omiga2.0、Dnasis等分子生物学软件进行分析,并与标准M41株、T株等进行序列比较,结果表明:山东传支
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