猪瘟病毒EO蛋白的原核表达及其重组蛋白活性测定

来源 :福建畜牧兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zouximu19840420
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通过重叠PCR合成猪瘟病毒EO基因,将该片段定向插入到pET-22b载体中,构建原核表达载体pET-22h/EO。转化大肠杆菌B121(DE3),IPTG诱导表达,比较不同诱导每件下的蛋白表达,确定其最佳表达每件。重组蛋白主要以包涵体的形式表达,Ni^2+亲和层析柱纯化蛋白。逐步透析法复性。通过方阵试验确定包被抗原的最适工作浓度,为了测定EO蛋白的活性,本文初步建立了检测猪瘟血清抗体水平的间接ELIA方法.为开发检测猪瘟抗体诊断试剂奠定基础。
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