【摘 要】
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采用Tac启动子控制表达质粒,在不同的宿主细胞中表达了青霉素G酰化酶(PAC).检测这些菌株所表达的PAC活性,分析细胞内分子伴侣GroEL含量、PAC翻译后加工为α、β亚基的状况,以
【机 构】
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华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,中国科学院上海生物工程研究中心
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采用Tac启动子控制表达质粒,在不同的宿主细胞中表达了青霉素G酰化酶(PAC).检测这些菌株所表达的PAC活性,分析细胞内分子伴侣GroEL含量、PAC翻译后加工为α、β亚基的状况,以及它们之间的关系.结果表明:质粒pKK-SP在不同宿主中表达时,翻译后加工状况有明显差异,单位质量细胞所表达的PAC活性与翻译后加工效率相关,且与细胞内分子伴侣GroEL在菌体总蛋白中含量正相关.同时也阐明了亚基的折叠成为翻译后加工过程的限制步骤,细胞内分子伴侣GroEL有助于PAC亚基的折叠和稳定.
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