基于ITS2序列的茅苍术及其近缘种DNA分子鉴定

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目的应用ITS2条形码鉴定茅苍术Atractylodes lancea及其近缘种药材。方法提取不同产地29份茅苍术、北苍术A.chinesis及白术A.macrocephala基因组DNA,通过PCR扩增ITS2序列并进行双向测序,测序结果提交至Gen Bank;从Gen Bank下载茅苍术及其菊科近缘种10种45条ITS2序列;对提交与下载的73条序列,应用MEGA 5.1软件进行序列比对,计算种内和种间距离,采用相似性搜索法、最近距离法进行鉴定分析,并构建Neighber-jioning(NJ)系统进化树直观反映鉴定结果。结果茅苍术药材ITS2序列长度均为229 bp,是1个单倍型;与菊科近缘种苍术属药材距离较近,与菊科其他属近缘种之间遗传距离较远,NJ树结果显示茅苍术及其近缘种药材均可明显区分,表现出良好的单系性,依据ITS2二级结构,也可以直观地将茅苍术与菊科近缘种药材区分。结论 ITS2序列作为DNA条形码能稳定、准确鉴别茅苍术药材,为保障临床安全用药提供了新的技术手段。
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