截短绿色荧光蛋白突变体反式剪接修复核酶

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：chengshisanren

【摘要】

：

Ⅰ型内含子核酶经过设计特定的信号引导序列(IGS),可特异性地定点剪接目的基因RNA,从而在RNA水平达到修复病变基因的目的.以四膜虫材料,克隆了其26S rRNA内含子核酶基因,体外

【作者】

：

李冰熊宇泉涂洪斌刘启才邹东霆周问渠陈耀勇

【机构】

：

广州医学院实验医学研究中心

【出处】

：

生物工程学报

【发表日期】

：

2005年5期

【关键词】

：

Ⅰ型内含子核酶剪接修复载体绿色荧光蛋白 group Ⅰ introns ribozyme splicing restoring vector green

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Ⅰ型内含子核酶经过设计特定的信号引导序列(IGS),可特异性地定点剪接目的基因RNA,从而在RNA水平达到修复病变基因的目的.以四膜虫材料,克隆了其26S rRNA内含子核酶基因,体外转录证实该Ⅰ型内含子核酶具有完全的自我剪接的功能.为检测该核酶的反式剪接功能,构建了缺失后半段564bp基因序列的绿色荧光蛋白(GFP)的截短突变体重组质粒XYQ5/XYQ10-pEGFP-C2,并证实其失去了发射绿色荧光的活性.利用PCR和分子克隆技术,构建了以上EGFP突变体的反式剪接修复核酶ptrans-rib-CMV

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