激活方法对大鼠-小鼠种间体细胞核移植重组胚发育的影响

来源 :军事医学科学院院刊 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yulequ
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目的 :探讨电激活及化学激活对大鼠_小鼠种间体细胞核移植重组胚发育的影响。方法 :采用血清饥饿法同步化处理的SD大鼠成纤维细胞作为供体细胞 ,常规超排KM小鼠获得卵母细胞 ,采用盲吸法去核 ,显微直接注核法构建重组胚 ,分别采用 6_DMAP +乙醇、放线菌酮、透明质酸酶 3种化学激活方法和不同电场强度、脉冲电激活重组胚 ,CZB培养液中培养 ,观察重组胚发育。结果 :电激活 :电场强度 (V cm) 脉冲时间 (ms)为 :10 0 0 10 0 ,15 0 0 30 ,180 0 30 ,2 4 0 0 4 0时 ,卵裂率分别为 :17.39% ,2 8.0 7% ,2 6 .5 2 % ,0 .0 0 %。化学激活 :使用透明质酸酶、放线菌酮、6_DMAP +乙醇时卵裂率分别为 :5 .5 6 % ,2 5 .0 0 %和 33.91%。结论 :电激活和化学激活均可有效激活重组胚 ;电激活时当电压为 15 0 0~ 180 0V cm、脉冲为 30~ 4 0ms时 ,有利于重组胚的发育 ,电压过高时会将重组胚击碎 ;本实验所有激活方法中 ,6_DMAP +乙醇激活法所得卵裂率和桑椹胚率最高。
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