基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路和肠黏膜屏障保护因子探讨魔芋润肠复合膳食纤维治疗便秘大鼠作用机制

来源 :中药药理与临床 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lipz7517
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目的:探讨魔芋润肠复合膳食纤维对便秘大鼠的治疗作用及对Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)炎症通路和结肠黏膜屏障的影响。方法:将SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、魔芋润肠复合膳食纤维0.54、1.08 g/kg组和首荟通便胶囊0.38 g/kg组。大鼠2次/d腹腔注射洛哌丁胺3 mg/kg,第8 d后,各给药组灌胃给予相应药物。给药2 w后,进行体质量、食物摄入量、首次排便时间、排便粒数/质量、粪便含水量、胃排空率、肠道推进率和粪便短链脂肪酸测定;测定血液中白细胞介素(IL-4)、IL-10和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β、IL-6、γ干扰素(IFN-γ)、胃泌素(GAS)、胃动素(MTL)、生长抑素(SS)、P物质(SP)、血管活性肽(VIP)和乙酰胆碱酯酶(ACh E)、降钙素基因相关肽(CGRP)、ROS、LDH、GSH-Px、SOD、CAT、MDA和MPO含量或活力,观察结肠组织形态学、病理学评分;Real-time PCR检测结肠组织中Tlr4、Myd88、Nfκb、Claudin1、E-cadherin、Occludin、Muc2、Tff3、Zo1 mRNA表达;Western blot检测结肠组织中Claudin1、E-cadherin、Occludin、MUC-2、TFF3、ZO-1蛋白表达。结果:正常对照组比较,模型对照组大鼠体质量、摄食量和结肠病理学评分明显升高,结肠黏膜完整性恶化,排便时间延长,胃排空率、小肠推进率及24 h排泄粪便粒数、粪便湿、干质量和含水量显著降低(P<0.01);血清中IFN-γ、IL-1β、IL-6、TNF-α、SS、VIP、CGRP、LDH、ROS、MDA活力或含量显著升高,结肠组织中MPO含量显著升高(P<0.01);血清中IL-4、IL-10、SOD、CAT、GSH-Px、Gas、MTL、SP、AChE含量显著降低,粪便中总SCFA和乙酸、丙酸、丁酸含量降低(P<0.05或P<0.01);结肠组织中Tlr4、Myd88、Nfκb mRNA表达水平上调,结肠组织中黏膜屏障保护因子Claudin1、E-cadherin、Occludin、Muc2、Tff3、Zo1 mRNA和蛋白表达显著下调(P<0.01);用魔芋润肠复合膳食纤维0.54、1.08 g/kg组治疗后,上述指标被明显逆转(P<0.05或P<0.01)。结论:魔芋润肠复合膳食纤维对洛哌丁胺诱导的大鼠便秘有较好治疗作用,其作用机制可能与增强内源性抗氧化系统功能、抑制氧化应激和炎性激活,从而增加肠黏膜屏障保护因子的蛋白表达、胃肠激素和SCFA分泌有关。
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