【摘 要】
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目的应用雷帕霉素体外预处理小鼠树突细胞(DC)，制备耐受树突细胞(Tol-DC)，并建立同种异基因小鼠皮肤移植模型，Tol-DC过继性输注到小鼠体内，观察移植皮片存活时间及Treg/Th17细胞表达，探讨其诱导移植免疫耐受的可能机制。方法在小鼠骨髓来源的DC前体培养过程中加入粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)，白细胞介素4 (IL-4)和雷帕霉素，用流式细胞仪检测各组DC表面CD11c、
【机 构】
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目的应用雷帕霉素体外预处理小鼠树突细胞(DC)，制备耐受树突细胞(Tol-DC)，并建立同种异基因小鼠皮肤移植模型，Tol-DC过继性输注到小鼠体内，观察移植皮片存活时间及Treg/Th17细胞表达，探讨其诱导移植免疫耐受的可能机制。
方法在小鼠骨髓来源的DC前体培养过程中加入粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)，白细胞介素4 (IL-4)和雷帕霉素，用流式细胞仪检测各组DC表面CD11c、CD40和CD80的表达；MTT比色法行体外混合淋巴细胞反应(MLR)观察每组对同种T细胞的刺激增殖能力；同时建立皮肤移植模型，观察皮肤移植前7 d经尾静脉注射Tol-DC的受者移植物存活情况；第9天取其脾脏，检测Treg/Th17细胞变化，取移植皮肤HE染色观察炎性细胞的浸润情况。
结果Tol-DC组显著抑制了外源刺激下DC的成熟过程和表面共刺激分子(CD40、CD80)的表达，并显著抑制其同种T细胞激活能力(P<0.01)；而且Treg比例升高，Th17下降，小鼠皮肤存活时间延长，炎症反应减轻。
结论应用雷帕霉素能够制备耐受性树突细胞，并诱导小鼠移植免疫耐受，这种作用是通过扩增Treg细胞，抑制Th17细胞而实现的，从而为在临床应用Tol-DC诱导供者特异性免疫耐受提供新的策略。
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