【摘 要】
：
目的了解牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)fimA基因变异性,构建fimA基因原核表达系统,鉴定其表达产物(rFimA)的致炎作用,检测FimA在Pg临床菌株中表达频率,了解Fi
论文部分内容阅读
目的了解牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)fimA基因变异性,构建fimA基因原核表达系统,鉴定其表达产物(rFimA)的致炎作用,检测FimA在Pg临床菌株中表达频率,了解FimA与慢性牙周炎的关系.方法采用高保真PCR从6株Pg临床菌株中扩增fimA基因并测定其核苷酸序列.构建fimA基因原核表达系统,制备rFimA兔抗血清.采用Western blot鉴定rFimA抗原性和免疫反应性.建立ELISA检测38株Pg临床菌株FimA表达情况和97例慢性牙周炎患者212份龈下菌斑标本中的FimA.检测rFimA诱导人脐静脉内皮EVC-304细胞分泌IL-1、IL-8、TNF-α和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的作用.结果 6株Pg临床菌株fimA基因核苷酸序列完全相同.所构建的原核表达系统rFimA产量高达细菌总蛋白的50%左右.rFimA可与Pg全菌抗血清发生结合反应,免疫家兔可获得高效价抗体.94.7%(36/38)菌株和91.5%(194/212)龈下菌斑标本ELISA结果阳性.1和10μg的rFimA作用EVC-304细胞48 h,其分泌的IL-1α水平升高(P＜0.05);但作用12 h即可出现高水平的ICAM-1(P＜0.05),未发现有诱导IL-8和TNF-α的作用(P＞0.05).结论 fimA基因序列保守,在Pg临床菌株中有很高的表达频率.rFimA有良好的抗原性和免疫反应性,可作为Pg血清学检测试剂盒和段疫苗的候选抗原.rFimA有较强的诱导细胞分泌ICAM-1的作用.
其他文献
以模糊控制理论为基础,TDN-ACS+计算机控制技术试验系统为平台,设计了一个基于模糊技术的计算机温度控制系统.该系统的核心模糊控制器,是一个在试验基础上设计出的控制规则表
电流变体是一种极具发展前景的智能材料,它的剪切强度随着外加电场强度的不同而改变,且响应速度极快,为主动振动控制的实现提供了新的途径.文中介绍了自行研制的两种不同原理
目的寻找一种敏感、特异的方法检测弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)bcl-2/IgH基因重排,并通过测定产物的序列,以了解所建方法的可靠性。方法运用专业引物设计软件设计bcl-2/IgH基
给出了柱形体的一种有价值的极化散射矩阵的定义（Ss），Ss具有6个自由度，它包含了柱形体散射的所有信息，利用它可以很容易地定义和计算平行极化RCS与垂直极化RCS等，也很容易推导出线
目的探讨载脂蛋白J(ApoJ)外显子3、4、7、8基因多态性与2型糖尿病(T2DM)的关系.方法 2002-11～2003-06对贵阳医学院附属医院,利用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳技术(PCR-DGG
血管通路是终末期尿毒症患者的重要生命线,临床工作中经常会遇到透析时患者血流量不足的情况.我室1996年10月～2003年12月在遇到此情况时,即紧急采取选择直接穿刺动脉(桡动脉或
按金葡菌多重耐药转运蛋白NorA的编码序列设计引物,以金葡菌基因组DNA为模板,扩增出基因norA中约1155bp的cDNA片段,将所得片段与pMD18-T载体连接,转化到感受态大肠埃希菌JM10
目的了解表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是否诱导人胃癌细胞株MKN45凋亡及其凋亡信号传导途径,为其临床应用提供进一步的理论依据.方法用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测EGCG
为探究吕家坨井田地质构造格局,根据钻孔勘探资料,采用分形理论和趋势面分析方法,研究了井田7
介绍了Kelvin探头振动电容法在腐蚀中的应用原理及试验装置 ,Kelvin探头 (也称为振动电容法 )技术应用到金属腐蚀的研究中 ,可以在不需与被测试样表面相接触的条件下 ,用Kelv