【摘 要】
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参考GenBank登录的猪肺炎支原体（Mhp）P46基因序列，利用Primer5．0软件设计合成引物，通过重叠延伸PCR（SOE-PCR）对猪肺炎支原体P46基因的3个位点进行定点突变，将此突变基因插入到表达载
【机 构】
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江苏省农业科学院兽医研究所,青岛农业大学动物科技学院
【基金项目】
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江苏省自然科学基金项目(BK2007711);江苏省农业科学院基金项目(6110640)
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参考GenBank登录的猪肺炎支原体（Mhp）P46基因序列，利用Primer5．0软件设计合成引物，通过重叠延伸PCR（SOE-PCR）对猪肺炎支原体P46基因的3个位点进行定点突变，将此突变基因插入到表达载体pET-32a（＋）中，经IPTG诱导后成功地在大肠杆菌Rosetta（DE3）宿主菌中表达分子量约为63500的融合蛋白。WesterRblotting分析表明，该融合蛋白具有较好的免疫原性。为猪肺炎支原体抗体ELISA检测方法的建立奠定了基础。
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