小麦秆锈菌RAPD扩增体系的正交优化

来源 :沈阳农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wgsgdy
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针对RAPD扩增技术在小麦秆锈菌遗传多样性的分析研究中重复性较低的不足,对小麦秆锈菌RAPD扩增体系进行优化。以小麦秆锈菌不同的生理小种为材料,采用L16(4^5)正交试验设计,考察模板DNA、Mg^2+、TaqDNA聚合酶、dNTPs和随机引物浓度5个因素的影响,并对退火温度和循环次数进行优化。结果表明:小麦秆锈菌RAPD扩增的较优体系为25μL体系中含1×Buffer,40ng·μL^-1模板DNA,1.5mmol·L^-1Mg^2+,2.0U TaqDNA聚合酶,0.2
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